荔枝核总黄酮抗大鼠肝纤维化作用机制的研究

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目的:研究荔枝核总黄酮(total flavone from Litchi Chinensis Sonn,TFL)对二甲基亚硝胺(dimethylnitrosamine,DMN)肝纤维化大鼠肝细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:将SPF级雄性SD大鼠40只,随机分为空白对照组、肝纤维化模型组、TFL高剂量给药组(200mg/Kg· d)、TFL低剂量给药组(100mg/Kg·d),每组各10只。以DMN腹腔注射制备大鼠肝纤维化模型,造模同时分别以高、低剂量的TFL灌胃进行干预治疗,空白对照组及肝纤维化模型组分别以生理盐水(5ml/kg)灌胃进行对照。6周后处死大鼠,各组取大鼠肝组织和血清标本,HE及Masson染色观察肝纤维化严重程度,免疫组织化学染色检测肝组织凋亡相关蛋白Bcl-2(细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白,B cell lymphoma/leukemia-2protein B)、Bax(Bcl-2相关X蛋白,Bcl-2-associated X protein)的表达变化。全自动生化分析仪检测肝功能丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)的水平。结果:大鼠肝纤维化模型成功建立。免疫组织化学染色结果显示,模型组大鼠肝组织中Bcl-2、Bax的表达较正常组均显著升高(P=0.000,P=0.000);TFL高、低剂量给药组Bcl-2的表达较模型组升高(P=0.000,P=0.049)、Bax表达较模型组降低(P=0.000,P=0.018);TFL高剂量组与低剂量组比较Bcl-2升高(P=0.019)、Bax显著降低(P=0.003)。肝纤维化的严重程度与Bax的表达显著正相关(r=0.930,P=0.000);与Bcl-2的表达负相关(r=-0.905,P=0.000)。空白对照组、TFL高低剂量给药组血清ALT(P=0.000,P=0.000,P=0.000)、AST(P=0.000,P=0.000,P=0.000)均明显低于模型组;TFL高剂量组与低剂量组比较ALT(P=0.001)、AST(P=0.000)水平均降低,具有显著性差异。结论:TFL具有较好的抗肝纤维化和减轻肝细胞损伤的作用;并推测这种作用可能与上调Bcl-2、下调Bax的表达,抑制肝细胞的凋亡有关,且具有一定的量效关系。肝纤维化的严重程度与Bcl-2的表达负相关、Bax的表达正相关。
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