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[目的](1)利用RT-PCR技术比较和分析结直肠癌粘膜组织与癌旁正常结直肠粘膜组织中miR-223-3p表达的差异性;用western blot技术比较和分析结直肠癌粘膜组织与癌旁正常结直肠粘膜组织中FOX03表达的差异性。(2)通过在线靶基因软件预测miR-223-3p的靶基因为FOX03,然后通过克隆FOX03基因3’ UTR,并通过定点突变和双荧光素酶实验证明miR-223-3p靶向FOX03。(3)在Caco2细胞中,通过敲低miR-223-3p提高FOX03蛋白表达;过表达miR-223-3p抑制FOX03蛋白的表达,证明miR-223-3p是可通过调控FOX03在结直肠癌的发生发展中起重要作用,可作为结直肠癌诊治的重要的分子生物学标志和治疗新靶点,初步探讨miR-223-3p在转录后水平调控FOX03表达机制,为探寻结直肠癌的发生发展的研究提供科学基础。[方法](1)收集10组结直肠癌粘膜组织和相应的癌旁正常结直肠粘膜组织,利用RT-PCR技术比较和分析结直肠癌粘膜组织与癌旁正常结直肠粘膜组织中miR-223-3p表达的差异性;用western blot技术比较和分析结直肠癌粘膜组织与癌旁正常结直肠粘膜组织中FOX03表达的差异性,实验组别包括结直肠癌粘膜组织组、癌旁正常结直肠粘膜组织组。纳入研究的患者都己在知情同意书上签字,未有肿瘤史及手术史,未有放化疗及其他免疫生物治疗史。(2)采用在线预测靶基因软件预测miR-223-3p的靶基因,初步选择的靶基因为FOX03,然后通过克隆FOX03基因3’ UTR和通过定点突变和双荧光素酶实验证明miR-223-3p与FOX03的相关性。(3)在Caco2细胞中,通过敲低miR-223-3p和过表达miR-223-3p检测FOX03的表达水平,初步探讨miR-223-3p在转录后水平调控FOX03表达机制。[结果](1)RT-PCR技术实验结果显示:miR-223-3p的表达水平在结直肠癌粘膜组织中较相应的癌旁正常结直肠粘膜组织中显著增加,差异有统计学意义(P<0.01);(2)western blot技术实验结果显示:FOX03的表达水平在结直肠癌的粘膜组织中较相应的癌旁正常结直肠粘膜组织中的表达水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);(3)采用在线靶基因软件预测miR-223-3p的靶基因可能为FOX03,然后通过克隆FOX03基因3’ UTR、定点突变和双荧光素酶结果显示.:miR-223-3p可以显著下调野生型FOX03报告基因质粒的荧光素酶活性,但是不能下调突变型FOX03报告基因质粒的荧光素酶活性,以上结果进一步说明,miR-223-3p靶向FOX03基因;(4)在Caco2细胞中过表达miR-223-3p后,能够显著增加miR-223-3p的水平,与转染miR-NC相比,miR-223-3p具有降低FOX03蛋白水平的趋势;敲低miR-223-3p,能够显著降低 miR-223-3p 的水平,与转染 antagomiR-NC 相比,antagomiR-223-3p 具有提高FOX03蛋白水平的趋势,但均未达到显著性。[结论](1)miR-223-3p在结直肠癌粘膜组织中表达显著上调,FOX03在结直肠癌粘膜组织中表达显著下调;(2)miR-223-3p可通过靶向FOX03基因参与调控结直肠癌的发生发展;(3)miR-223-3p作为结直肠癌诊断和治疗的分子生物学标志物和治疗新靶点具有较高价值,为探索结直肠癌的发生发展的研究提供科学基础。