单甲氧基聚乙二醇修饰超氧化物歧化酶的研究

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通过三种不同方法(N-羟基琥珀酰亚胺、N,N’-羰基二咪唑、对甲苯磺酰氯)对单甲氧基聚乙二醇(MPEG)进行活化,得三种活化衍生物(SS-MPEG、咪-MPEG、Tosyl-MPEG),并测定了各自的活化度;再用这三种活化衍生物对超氧化物歧化酶(SOD)进行化学修饰,上G-75柱提纯,收集第一峰,得到最后产物MPEG-SOD。结果发现SS-MPEG对SOD的修饰程度最高,咪-MPEG其次,Tosyl-MPEG的修饰程度最低,说明N-羟基琥珀酰亚胺的活化活性最高,对甲苯磺酰氯的活化活性最低。经过圆盘等电聚焦电泳法测定,修饰酶的等电点为4.1,比天然酶略有降低。经过研究,发现修饰酶对酸碱的稳定性、胃蛋白酶、胰蛋白酶的耐受性,都比天然酶有明显的提高。说明了经过MPEG修饰过的SOD更加稳定。
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