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研究背景：同型半胱氨酸(homocysteine，HCY)及其代谢酶基因多态性是近年来国内外脑血管疾病领域研究的热点和前沿问题。大量研究发现，HCY可引起动脉粥样硬化，是心脑血管动脉粥样硬化的独立危险因素。HCY导致动脉粥样硬化的机制目前尚不完全清楚，其大致可能的机制有：引起血管内皮细胞功能障碍，包括内皮细胞依赖性血管舒张功能损害，减少一氧化氮(nitric oxide，NO)的生物利用度，增加内皮细胞对循环单核细胞的聚集和吸附，抑制血管内皮细胞的抗血栓作用，此外，HCY还通过活化炎症反应、引起氧化应激反应、降低转甲基化反应，以及影响脂类代谢、促进平滑肌细胞增殖等方式，导致动脉粥样硬化。多种原因可导致高同型半胱氨酸血症(hyperhomocysteinemia，HHCY)，包括遗传因素、食物摄入不足、药物因素、种族、性别与年龄、肾功能下降等。影响HCY在体内代谢的酶有：亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydr-ofolatereductase，MTHFR)、蛋氨酸合成酶(methionine synthase，MS)、蛋氨酸合成酶还原酶(cystathioninebeta-synthase，MTRR)、胱硫醚β-合成酶(CBS)等，这些关键酶的缺陷或基因突变，可引起酶活性下降，直接或间接影响HCY在体内的代谢，导致HHCY。其中，MTHFR是HCY代谢的关键酶之一[1]，最常见的基因突变：677位点C→T突变，可使酶活性区的丙氨酸被缬氨酸替代，酶活性下降，并产生不耐热性。5-甲基四氢叶酸，作为HCY主要代谢途径--再甲基化过程的甲基供体，要由5，10-甲基四氢叶酸在MTHFR的作用下生成，MTHFR活性的下降，减少了5-甲基四氢叶酸的生成，HCY再甲基化受阻，在细胞内蓄积，最终导致HHCY。脑血管狭窄，包括颅外动脉狭窄和颅内动脉狭窄，是缺血性卒中的高危因素，其导致缺血性卒中的重要发病机制包括继发的血流动力学改变致使供血区低灌注以及动脉粥样硬化性斑块脱落的微栓子引发动脉-动脉栓塞等[2]。研究表明，亚洲人颅内动脉狭窄比颅外动脉狭窄多发，欧美人则以颅外动脉狭窄更常见[3]，在亚洲，颅内动脉狭窄引起30~50%的卒中，在北美，则引起8~10％的卒中。同时亚洲人的MTHFR677位点C→T突变的T等位基因频率较欧美人高。鉴于此，T等位基因是否是导致亚洲人群颅内动脉狭窄比颅外动脉狭窄更常见的原因之一，MTHFR677位点C→T突变是否在颅内动脉狭窄患者中更常见，未见相关文献报道。我们通过检测单纯颅内动脉狭窄患者和单纯颅外动脉狭窄患者和无脑血管狭窄者血清HCY水平和MTHFR677位点的基因分型，以进一步确定，HHCY是否是脑血管狭窄的独立危险因素，其在颅内外动脉狭窄患者血清中的水平是否存在差异，进一步明确MTHFR677位点C→T突变与HCY的关系，T等位基因频率在颅内外动脉狭窄患者中的差异，旨在为脑血管病的预防提供实验依据和有价值的线索。目的：探讨同型半胱氨酸(HCY)及其代谢酶-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T基因多态性与颅内外动脉狭窄的关系。方法：采用回顾性病例对照研究方法，纳入脑动脉狭窄患者85例，包括颅内动脉狭窄患者40例，颅外动脉狭窄患者45例，同时选择同期年龄和性别匹配的无明显脑血管狭窄的健康体检者65例做为对照。分别采用荧光偏振免疫法(FPIA)和聚合酶链反应-限制片段长度多态性(PCR-RFLP)技术测定和分析各组血浆同型半胱氨酸水平和MTHFR C677T基因多态性。结果：①脑动脉狭窄组血浆HCY浓度中位数为[11.00(8.05~15.00)，μmol/L]，高于对照组[8.40(5.50~10.95)，μmol/L](P <0.05)；与对照组相比，单纯颅内动脉狭窄组[11.75(8.10~15.25)，μmol/L]和单纯颅外动脉狭窄组[9.00(8.00~14.05)，μmol/L]血浆HCY浓度均升高(P <0.05)，但两组间的HCY水平差异无无统计学意义(P＞0.05)。②在脑动脉狭窄组和对照组中，MTHFR C677T基因突变TT纯合子的HCY水平中位数分别为[16.00(11.93~17.30) μmol/L]、[12.90(8.90~14.05)，μmol/L]，显著高于CC无突变纯合子的HCY水平[9.00(8.00~12.80)，μmol/L]、[8.60(5.10~11.05)，μmol/L](P <0.05)，单纯颅内动脉狭窄组、单纯颅外动脉狭窄组和组间的TT纯合子率和T等位基因率差异无统计学意义(P＞0.05)。③多因素Logistic回归分析结果，高HCY血症(HHCY)患脑血管狭窄的相对危险度为2.69(95%CI：1.05～6.87，P=0.039)，而高血压患脑血管狭窄的相对危险度为2.43(95%CI：1.23～4.82，P=0.011)。未显示MTHFR C677T基因型与脑血管狭窄具有明显相关性(P=0.909)。结论：高同型半胱氨酸血症可能是脑动脉狭窄，包括颅内及颅外动脉狭窄的危险因素；MTHFR C677T基因型与颅内动脉狭窄或颅外动脉狭窄无明确直接相关性，MTHFR677C→T基因型突变是影响HCY水平的重要因素，但与颅内外动脉狭窄的分布无关。