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目的：通过T抗原合成酶的真核表达质粒(pcDNA3.1-T-synthase)以及针对T抗原合成酶的特异性shRNA表达质粒(pRNAT-U6.1/Neo-T-synthase-shRNA)构建具有不同T抗原合成酶表达水平的骨肉瘤细胞株，并检查骨肉瘤细胞株表面T抗原的表达水平，并进一步检测不同T抗原表达水平骨肉瘤细胞株与T细胞共同培养后对T细胞功能的影响。 方法：(1)构建pcDNA3.1-T-synthase及pRNAT-U6.1/Neo-T-synthase-shRNA真核表达质粒，并检测序列的正确性。(2)将成功构建的pcDNA3.1-T-synthase及pRNAT-U6.1/Neo-T-synthase-shRNA真核表达质粒转染骨肉瘤细胞，并检测LM8骨肉瘤细胞内T抗原合成酶的mRNA表达水平。(3)检测不同T抗原合成酶mRNA表达水平骨肉瘤细胞株细胞表面T抗原的表达水平。(4)流式细胞术检测不同T抗原表达水平骨肉瘤细胞体外培养增殖能力的变化。(5)将高表达T抗原的骨肉瘤细胞株注射C3h小鼠皮下，一周后提取小鼠淋巴细胞与不同T抗原表达水平的骨肉瘤细胞共同培养，并流式细胞术检测共同培养后T细胞增殖、凋亡及分泌γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素2(IL-2)等能力的变化。 结果：(1)成功构建T抗原合成酶真核表达质粒及针对T抗原合成酶的特异性shRNA表达质粒，并检测其序列正确。(2)RT-PCR结果显示：LM8骨肉瘤细胞转染pcDNA3.1-T-synthase能显著提高T抗原合成酶的mRNA表达水平；LM8骨肉瘤细胞转染pRNAT-U6.1/Neo-T-synthase-shRNA表达质粒能显著降低T抗原合成酶的mRNA表达水平。(3)流式细胞术结果显示：T抗原合成酶不同核酸表达水平能显著调节骨肉瘤细胞表面T抗原的表达水平。(4)流式细胞术结果显示：T抗原高表达能促进骨肉瘤细胞的增殖，T抗原低表达能抑制骨肉瘤的增殖。(5)T细胞与不同T抗原表达水平骨肉瘤细胞共同培养后，T抗原高表达组：CD4+T细胞和CD8+T细胞增殖明显提高、CD4+T细胞和CD8+T细胞凋亡显著减少、CD4+T细胞和CD8+T细胞分泌IL-2和IFN-γ的功能增加；T抗原低表达组：CD4+T细胞和CD8+T细胞增殖明显下降、CD4+T细胞和CD8+T细胞凋亡显著增加、CD4+T细胞和CD8+T细胞分泌IL-2和IFN-γ的能力下降。 结论：所构建的pcDNA3.1-T-synthase及pRNAT-U6.1/Neo-T-synthase-shRNA表达质粒能显著提高或降低T抗原合成酶的表达。调节骨肉瘤细胞内T抗原合成酶的核酸表达能显著改变细胞表面T抗原的表达。骨肉瘤表面T抗原高表达能促进骨肉瘤细胞的增殖能力。此外，T抗原也能显著调节免疫细胞功能，T抗原高表达能促进CD4+T细胞和CD8+T细胞增殖，并抑制CD4+T细胞和CD8+T细胞凋亡，促进CD4+T细胞和CD8+T细胞分泌IL-2和IFN-γ，从而增加T细胞特异性肿瘤杀伤功能，为构建T抗原特异性肿瘤疫苗奠定实验基础。