太子参对照品的制备及质量控制研究

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本论文以传统中药——太子参为主要研究对象,为其制备对照品,对太子参质量控制进行研究。采用水提醇沉法、sevag法对太子参多糖进行提取,使用Sephadex G-100凝胶对其进行了两次纯化,得到了太子参精制多糖,采用苯酚-硫酸法对此多糖进行含量测定,其含量达到80%以上。利用实验室自制太子参精制多糖作为太子参药材的对照品,对苯酚-硫酸法的测定条件进行筛选并对此方法进行了方法学验证,实验结果表明,精密度、重复性、稳定性以及加样回收率均符合要求,在苯酚-硫酸法最优条件下对8批太子参药材中多糖的含量进行了测定,多糖含量在9.05%~17.34%之间,平均含量为:13.34%,其中太子参(药材编号3)的含量最高,太子参(药材编号8)的含量最低。采用TLC法和柱前衍生化-HPLC法对太子参多糖中单糖的组成进行鉴定,这两种方法均需先将多糖进行水解,本实验采用的是高温强酸的方法。得到的多糖水解液先采用TLC法进行了初步的鉴定,确定TLC法的展开剂为:乙酸乙酯:吡啶:无水乙醇:水=8:1:1:2;显色剂为:2%苯胺:2%二苯胺:85%磷酸=5:5:1;显色温度不宜超过100℃:显色时间在5 min之内。结合显色情况和比移值,确定其中含有鼠李糖和木糖,可能含有葡萄糖和半乳糖,不存在果糖。然后采用柱前衍生化-HPLC法对太子参多糖中单糖组成进一步的鉴定,将水解液与1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)进行衍生化反应,将所得的衍生化产物用HPLC检测,根据各组分的保留时间可以确定太子参多糖中含有鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和木糖等单糖。本研究以鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和木糖四种单糖为对照品,对太子参药材中单糖的含量进行研究。首先采用单因素考察法对液相的色谱条件进行筛选,在最优色谱条件下对多糖的水解条件和衍生化反应的条件进行筛选,最终确定了太子参药材中单糖含量测定的方法,并对此方法进行了方法学验证,精密度、重复性、稳定性以及加样回收率均符合要求,利用柱前衍生化-HPLC法对8批太子参药材中各种单糖的含量进行了测定,8批太子参药材中,鼠李糖的含量在3.27%~12.20%之间,平均含量为:9.14%;葡萄糖的含量在3.17%~7.78%之间,平均含量为:4.67%,但太子参(药材编号8)未检测到葡萄糖;半乳糖的含量在12.97%~16.82%之间,平均含量为:14.65%;木糖的含量在14.99%~20.37%之间,平均含量为:17.29%,其中太子参(药材编号3)的各单糖的含量均较高与其他批次的太子参,太子参(药材编号8)的各单糖的含量相对较低。
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