不孕不育症已成为一种常见的、多发的、严重影响人们生活质量的疾病。人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG),作为天然激素,是人类妊娠时由胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白激素;作为药物,其在治疗女性不孕、诱导排卵以及体外受精胚胎移植技术(俗称试管婴儿)的应用中起到重要的作用。传统商业化生产的尿源hCG(u-hCG)的方法是从孕妇尿中提取,但其存在许多缺点;随着生物技术的发展,DNA重组技术越来越成熟,带动生物制药蓬勃发展,目前通过DNA重组技术表达的重组hCG(r-hCG)药物已经上市,它弥补了u-hCG药物的不足。HCG由α、β亚基通过非共价方式连接,其中α亚基含有2个N-糖链,β亚基含有2个N-糖链和4个O-糖链。作为一种糖蛋白分子,hCG糖基化程度很高,造成了hCG分子含有很多种糖基化程度不一、糖型不同的异构体。不同的糖基化修饰造成了生物学功能各异的hCG分子形式存在。糖基化修饰对hCG的生物学功能有重要影响,特别是N-糖基化的作用,因此,hCG的糖基化特性鉴定与质控分析分析就显得尤为必要。本文选择了高效液相色谱技术与质谱联用技术,对珠海市丽珠单抗公司自主研发的hCG N-糖基化的结构特性进行特性表征和质控分析。本次的研究包括hCG的N-糖位点的确认,N-糖基化类型的鉴定,hCG糖蛋白的各类型糖基化比例分析方法的研究等。通过N-糖位点确认实验,α亚基的N-糖基化位点均在Asn52和Asn78,β亚基的N-糖基化位点均在Asn13和Asn30,并与理论一致。通过N-糖类型鉴定实验,鉴定出hCG的糖基化类型有17种以上,其中绝大部分N-糖位唾液酸化糖(NGNA);通过方法研究,确认开发的N-糖基化比例分析方法满足药物研究及药物分析的需求,并通过N-糖相对含量检测技术评估了丽申宝、艾泽,以及丽珠单抗公司研发的hCG的差异性。并以hCG为分子模型,为后续蛋白药物的N糖-相对含量测定提供实验方法。