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中风是世界第二大致死性第一大致残性疾病。因此需要开发有效地治疗手段来预防中风发生，同时减少缺血再灌注造成的损伤。电针是一种传统医学与现代电疗结合的新的治疗手段。由于针刺对于很多心脑疾患都有很好的疗效，电针疗法是对传统针刺的一大提升。我们近年的研究显示，电针能够发挥预处理效应，诱导脑缺血耐受。随后的机制研究显示，电针的预处理效应涉及到许多信号通路，如提高抗氧化物活性、调节内源性大麻素系统以及抑制凋亡。脑内星形胶质细胞在缺血后第一个受到损伤，并启动级联反应，影响神经元的转归。NDRG2表达于星形胶质细胞，并可能参与星形胶质细胞的功能调节，我们前期研究也证实NDRG2在脑缺血损伤后表达上调。但其在电针预处理诱导的脑缺血耐受中的作用以及上下游调节机制尚不清楚。本研究旨在探讨NDRG2在电针预处理中的作用，并研究其上下游调节机制。实验一NDRG2在电针预处理诱导的脑缺血耐受作用的研究目的：探讨NDRG2在电针预处理诱导的脑缺血耐受中的作用方法：60只雄性SD大鼠，体重280-320g，随机分为3组(n=20)：假手术组(Sham)：不插入栓线，其余处理同MCAO组；对照组(Con)：建立MCAO模型，再灌注24h后处死；EA组(EA)：单次电针刺激，刺激后2h行MCAO，再灌注后24h处死动物。动物处死后取材，用免疫荧光双标法定性观察NDRG2蛋白的细胞分布，Western Blot定量检测NDRG2蛋白表达，RT-PCR半定量测NDRG2mRNA表达，免疫荧光双标法测NDRG2的细胞定位，细胞凋亡用TUNEL法检测。结果：缺血再灌24h后，NDRG2表达上调且主要分布于缺血半影区的GFAP阳性细胞中，NDRG2mRNA的表达和蛋白表达趋势一致。NDRG2在假手术组主要定位于星形胶质细胞的胞浆，单纯缺血时则主要定位于胞核，电针预处理组NDRG2表达较缺血组减少，胞核与胞浆均存在定位。TUNEL与NDRG2双标结果显示：NDRG2信号与TUNEL阳性细胞存在共定位，电针预处理组缺血半暗区TUNEL与NDRG2双阳性细胞表达较缺血组减少。结论：电针预处理通过逆转NDRG2表达上调减少凋亡，从而诱导脑缺血耐受。实验二电针预处理通过EAAT2调节NDRG2表达的研究目的：探讨电针预处理是否通过EAAT2调节NDRG2表达方法：100只雄性SD大鼠，体重280-320g，随机分为5组(n=20)：假手术组(Sham)：不插入栓线，其余处理同MCAO组；单纯缺血组(Con)：建立MCAO模型，再灌注24h后处死；EA组(EA)：单次电针刺激，刺激后2h行MCAO，再灌注后24h处死动物；EAAT2激动剂(CXT)组；EAAT2抑制剂(DHK)组。再灌注后24h评价神经功能学评分及脑梗死容积，动物处死后取材，用免疫荧光双标法定性观察NDRG2蛋白的细胞分布，WesternBlot定量检测EAAT2及NDRG2蛋白表达。结果：CXT组神经功能学评分明显优于MCAO组，DHK组与MCAO组组间比较无显著统计学差异。CXT组脑梗死容积明显小于MCAO组(P<0.01)，DHK组与MCAO组组间比较无显著统计学差异。CXT组EAAT2表达高于MCAO组，DHK组与MCAO组组间比较无显著统计学差异。CXT组NDRG2表达低于MCAO组，DHK组与MCAO组组间比较无显著统计学差异。NDRG2主要分布于缺血半影区的GFAP阳性细胞中，在假手术组主要定位于星形胶质细胞的胞浆，MCAO时主要定位于胞核，电针预处理组胞核与胞浆均存在定位，CXT组主要表达于胞浆，DHK组多表达于胞核。结论：电针预处理可通过上调星形胶质细胞中EAAT2的表达，抑制NDRG2的上调，从而减轻脑缺血损伤。实验三2-AG通过NDRG2调节STAT3在脑缺血耐受中作用的研究目的：探讨2-AG通过NDRG2调节STAT3在脑缺血耐受中的作用方法：培养原代星形胶质细胞细胞，构建氧糖剥夺OGD模型模拟脑缺血。细胞转染pSRL-SIH1-H1-GFP后行OGD，对照组不施行OGD，其余同实验组。MTT及LDH检测细胞活力，Western Blot检测NDRG2及STAT3表达。随后转染pSRL-CDH1-GFP细胞后加入2-AG行OGD，MTT及LDH检测细胞活力，Western Blot观察NDRG2及STAT3表达。结果：MTT及LDH结果显示，ODG后星形胶质细胞活力较正常细胞降低，转染pSRL-SIH1-H1-GFP组细胞活力与正常细胞无差异；与正常星形胶质细胞相比，OGD后NDRG2、pSTAT3蛋白水平上调，而pSRL-SIH1-H1-GFP转染组NDRG2、pSTAT3蛋白水平低于ODG组。2-AG组细胞活力比OGD组细胞活力高，pSRL-CDH1-GFP转染细胞后，抑制了2-AG组的细胞生存；Western Blot结果显示，与OGD组相比，2-AG组NDRG2、pSTAT3表达下调，转染pSRL-CDH1-GFP后，逆转了2-AG对NDRG2、pSTAT3表达的抑制作用。结论：2-AG通过减少NDRG2表达从而抑制STAT3磷酸化产生神经保护效应。