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研究癌症中重要基因的结构及功能,对于了解癌症发生发展的分子机制以及癌症的有效治疗都具有重要意义。课题组在前期研究中发现一个结构与功能未知的新基因c1orf109。其在多种肿瘤组织中高表达。该基因定位于人类1号染色体短臂3区4带3亚带(1p34.3)。本课题在前期研究基础上,重点研究可与c1orf109启动子结合的转录因子对该基因的调控作用,进而明确该基因在肿瘤细胞中高表达的分子基础。首先,本研究采用生物信息学方法,分析了c1orf109在癌症中的突变及表达情况,通过预测c1orf109近端启动子区的潜在转录因子结合位点,获得目标转录因子。进而构建了转录因子c-Myc、NFκB-p65及AP1-Jun的pcDNA3.1表达重组体。其次,利用单荧光素酶报告技术、双荧光素酶报告技术、过表达以及siRNA干扰技术,来研究转录因子c-Myc、NFκB-p65及AP1-Jun对c1orf109启动子的调控作用。最后,利用染色质免疫共沉淀(ChIP)方法研究转录因子与c1orf109近端启动子区域的结合情况,从而证实转录因子对启动子具有调控作用。结果表明,c1orf109在癌症中无显著突变,在多种肿瘤组织中高表达。c1orf109具有多转录本特征,启动子区主要集中在2个区域,远端启动子区和近端启动子区。近端启动子活性远高于远端启动子,近端启动子的核心区域为-1~-177 bp。转录因子c-Myc对c1orf109近端启动子有正向调控作用,并且与c1orf109近端启动子的核心区域有直接结合,结合位点在转录起始位点上游-94 bp~-8 bp处。而转录因子NFκB-p65和AP1-Jun对c1orf109近端启动子区则不具有明显的正向调控作用。综上所述,本文探究了c1orf109在癌症中高表达的调控机制,证实了转录因子c-Myc对c1orf109近端启动子有正向调控作用,研究表明了二者有直接结合以及具体的结合区域。说明转录因子c-Myc通过与c1orf109基因的启动子直接结合,从而增强其转录活性,对其产生调控作用。