益气养血活血法干预COPD模型大鼠的实验研究

来源 :云南中医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Janette
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目的:本课题通过烟熏加脂多糖(LPS)气管内滴注的联合方法复制COPD大鼠模型,以益气养血活血法为指导,选择传统方药,分时间段对COPD大鼠模型进行中药干预后,检测并分析药物干预后各组的病理形态学变化,及肺组织匀浆中MMP-9/TIMP-1、TGF-β1、VEGF的差异,旨在进一步探讨益气养血活血法及云南名中医验方在不同时间段实施干预后,在改善或延缓COPD气道重塑病理变化的作用,并阐述其机理,为益气养血活血法防治COPD气道重塑提供一定的实验依据和理论依据,更好的指导临床防治本病。方法:1.分组:正常对照组、模型组、中药干预组(益气养血活血高、中、低剂量组、益气活血组高、中、低剂量组、益气养血组高、中、低剂量组)在0周段、4周段、8周段、12周段各有一组;阳性药物组在4周段、8周段、12周段各有一组,共47组,每组10只大鼠,共470只大鼠。2.复制COPD大鼠模型:采用熏烟加气管内滴入脂多糖(LPS)的联合方法复制COPD大鼠模型,大鼠模型复制时间分别是:0周段为28天;4周段为56天;8周段为84天;12周段为112天。3.药物干预:根据实验设计分不同时段给予不同组别药物干预,大鼠开始给药时间分别是:0周段从第2天开始;4周段从第29天开始;8周段从第57天开始;12周段从第85天开始。各时间段连续给药均为28天。4.指标检测:(1)观察各实验组大鼠的行为学变化。(2)制作肺组织病理切片,观察镜下肺内细支气管及血管周围炎性浸润及气道壁结构改变状况等。(3)应用酶联免疫吸附法,检测COPD大鼠肺组织中MMP-9/TIMP-1、VEGF、 TGF-β1的变化。结果:1.不同时间段模型组与正常对照组大鼠各检测指标的变化:MMP-9/TIMP-1比值,模型组低于正常对照组;VEGF、TGF-β1浓度,模型组高于正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。2.中药干预COPD大鼠后各指标的变化:2.1中药干预COPD大鼠后MMP-9的变化:0周段、4周段、8周段中药干预组高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。12周段中药干预组高于模型组,但YQYXHXG、YQYXG两组与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。2.2.中药干预COPD大鼠后TIMP-1的变化:0周段、8周段、12周段中药干预组高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);4周段中药干预组高于模型组,但YQHXG组与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05),其余各组与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。2.3中药干预COPD大鼠后MMP-9/TIMP-1的变化:0周段、4周段、8周段、12周段各中药干预组与模型组比较,中药干预组MMP-9/TIMP-1比值随着中药剂量的降低,差异有统计学意义(P<0.05)。2.4中药干预COPD大鼠后TGF-β1的变化:8周段、12周段中药干预组高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);0周段中药干预组高于模型组,但YQYXHXG、YQYXHXZ、YQYXG、YQYXZ、YQHXG五组与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05),其余各组与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05);4周段中药干预组高于模型组,但YQYXHXG、YQYXHXZ. YQYXG、YQHXG四组与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05),其余各组与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。2.5中药干预COPD大鼠后VEGF的变化:0周段、8周段、12周段中药干预组高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);4周段中药干预组高于模型组,但YQYXHXG组与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05),其余各组与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.益气养血活血法、益气养血法、益气活血法三种方法均能够改善COPD的病变,纠正肺病变微环境中MMP-9/TIMP-1比值的偏移状态;降低TGF-β1、VEGF的浓度,减缓COPD气道重塑病变的进程。2.益气养血活血法及云南名中医验方及不同药组的低剂量对COPD模型大鼠的干预效果更明显,提示临床等效剂量可有效缓解COPD气道重塑病变的进程;通过对四个时间段三种中药组干预后的COPD模型大鼠各项指标的统计,并未发现中药的干预效果在四个时间段上有明显的差别。3.本研究为临床通过益气养血活血法治疗COPD提供了实验依据和诊疗思路。
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