Galectin-7对食管鳞癌迁移侵袭和预测早期复发转移的作用

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目的:探讨Galectin-7在食管鳞癌迁移侵袭过程中具体作用以及联合检测MMP-9对于预测食管鳞癌早期复发转移的意义方法:(1)收集2012年3月-2013年3月期间,我院胸心外科手术切除的50例食管鳞状细胞癌(以下简称食管鳞癌)组织及38例癌旁5cm的食管鳞状上皮组织(以下简称癌旁组织)。通过检测Galectin-7和MMP-9在50例食管鳞癌组织及38例癌旁鳞状上皮组织中的表达差异与平均光密度值(mean optical density),分析在不同的临床和病理参数下,Galectin-7与MMP-9的表达意义。同时通过随访及复查,了解患者复发转移的情况,分析Galectin-7与MMP-9的平均光密度值在预测患者早期复发转移中的可能的作用。(2)以Eca-109细胞株为目的细胞,使用超滤离心管浓缩细胞外周上清液,通过Western-blotting检测其中Galectin-7的表达。在外周培养液中加入重组Galectin-7培养Eca-109细胞,qRT-PCR研究MMP-9基因mRNA的转录水平变化,并利用western-blotting检测MMP-9、p38、p-p38蛋白水平的变化。另外,分别通过细胞划痕、MTT,观察细胞迁移及生长曲线的变化。结果:(1)在食管鳞癌组织中,Galectin-7(33/50)和MMP-9(32/50)的表达均明显高于癌旁组织(2/38、4/38)(P=0.000)。Galectin-7的表达与临床分期(P=0.000)、浸润深度(P=0.000)、有无淋巴结转移有关(P=0.012),MMP-9的表达与临床分期(P=0.000)、肿瘤的浸润深度(P=0.000)、组织分化程度(P=0.021)以及是否出现淋巴结转移有关(P=0.028)。Galectin-7的平均光密度值与临床分期(P=0.000)、浸润深度(P=0.002)以及有无淋巴结转移有关(P=0.030)。MMP-9的平均光密度值与食管鳞癌的临床分期(P=0.000)、肿瘤的浸润深度(P=0.000)、组织分化程度(P=0.030)、是否出现淋巴结转移有关(P=0.000)。食管鳞癌组织中Galectin-7和MMP-9的表达(r=1,P=0.000)及平均光密度值(r=0.430,P=0.002)均呈显著正相关。对于术后早期的复发转移的预测,Galectin-7的最佳诊断工作点(cutoffpoint)为0.162灵敏度89.5%特异度为71%;MMP-9的最佳诊断工作点(cutoff point)为0.138,灵敏度94.7%特异度为77.4%;联合检测MMP-9和Galectin-7的最佳诊断工作点(cutoff point)为0.292,灵敏度94.7%,特异度为96.8%。(2)在细胞外周培养上清液中,存在Galectin-7的表达。加入重组Galectin-7培养Eca-109细胞后,MMP-9的表达在mRNA水平和蛋白水平都得到了显著提高,同时细胞的迁移能力也得到了提升。结论:在食管鳞癌组织中,Galectin-7和MMP-9的表达存在着显著相关性,由此推断二者在食管鳞癌的浸润、转移的过程中起重要的协同作用。对于食管鳞癌术后早期的复发转移,联合检测Gal ectin-7和MMP-9可更好的预测肿瘤的复发转移。Eca-109细胞能将Galectin-7分泌到细胞外,通过与细胞膜上的特异性糖基受体结合,促进MMP-9的表达,提高肿瘤细胞的的侵袭迁移能力。
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