【摘 要】
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蛋白质与各种生命活动息息相关,是生命科学中最为重要的研究对象之一,建立高效的蛋白质纯化方法是蛋白质研究的基础。石墨相氮化碳（Graphitic carbon nitride,g-C3N4）作为一种非常有潜力的固相萃取剂,在生物样品预处理领域中的应用还不够广泛。本论文将石墨相氮化碳与聚丙烯酸（Polyacrylic acid,PAA）的复合材料作为固相萃取剂应用到蛋白质的分离纯化过程中,建立了一种分
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蛋白质与各种生命活动息息相关,是生命科学中最为重要的研究对象之一,建立高效的蛋白质纯化方法是蛋白质研究的基础。石墨相氮化碳（Graphitic carbon nitride,g-C3N4）作为一种非常有潜力的固相萃取剂,在生物样品预处理领域中的应用还不够广泛。本论文将石墨相氮化碳与聚丙烯酸（Polyacrylic acid,PAA）的复合材料作为固相萃取剂应用到蛋白质的分离纯化过程中,建立了一种分离富集血红蛋白的新方法。第一章,首先简要介绍了蛋白质和血红蛋白,阐明了蛋白质分离纯化的重要意义,概述了几种蛋白质分离纯化的常用方法;其次,介绍了石墨相氮化碳的研究背景,合成方法及其在各个领域的重要应用。第二章,制备和表征了聚丙烯酸/石墨相氮化碳（PAA/g-C3N4）复合水凝胶。采用热聚合前驱体三聚氰胺的方法制备g-C3N4,将所得g-C3N4与丙烯酸混合,通过加入引发剂和交联剂,超声波下原位聚合得到PAA/g-C3N4复合水凝胶,并通过红外光谱分析、扫描电子显微镜、热重分析和Zeta电位对复合材料进行了表征。第三章,以PAA/g-C3N4复合水凝胶作为固相萃取剂选择性提取血红蛋白。根据Langmuir吸附模型,计算得到理论最大吸附容量为3333.3 mg g-1。吸附的血红蛋白可用pH 8.9的Tris-HCl缓冲溶液洗脱回收,洗脱效率可达到85%,圆二色光谱证明洗脱前后血红蛋白的构象没有发生改变,表明PAA/g-C3N4复合水凝胶的生物相容性良好。据此建立了一种人全血样品中血红蛋白提取的新方法,SDS-PAGE凝胶电泳结果显示该方法得到的血红蛋白纯度较高。
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