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目的:糖尿病性视网膜病变(DR)是糖尿病患者最严重的微血管并发症之一，目前发病机制尚未明确。通过模拟糖尿病的体内外环境，观察G蛋白偶联受体91(GPR91)对DR微血管病理改变的影响;探讨GPR91通过丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路调控VEGF的分子机制。 方法:构建GPR91小发夹RNA(shRNA)慢病毒载体及相应的空病毒。(1)体内实验:健康雄性SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病模型。成模2W时玻璃体腔注射GPR91 shRNA慢病毒。气相色谱质谱联用仪检测视网膜中琥珀酸含量。注射病毒后12W，HE染色，透射电镜和依文思蓝渗漏实验观察视网膜微血管的结构及功能改变。(2)体外实验:高糖/琥珀酸/低氧孵育的RGC-5细胞和原代视网膜神经节细胞转染GPR91 shRNA或siRNA，Western blot检测GPR91，p-ERK1/2, p-JNK, p-p38MAPK, COX-2, C/EBPβ, C/EBPδ, c-Fos和VEGF的表达情况;免疫荧光检测GPR91，C/EBPβ，C/EBPδ和c-Fos的胞内定位情况;RT-PCR检测GPR91，COX-2，C/EBPβ，C/EBPδ，c-Fos和VEGF的mRNA表达;ELISA检测PGE2和VEGF的分泌情况;RGC-5与RF/6A细胞共培养检测RF/6A细胞的增殖迁移能力;荧光素酶报告系统(Luciferase)和染色质免疫共沉淀(ChIP)检测C/EBP、AP1调控VEGF的转录情况。 结果:成功构建GPR91 shRNA慢病毒载体。(1)体内实验:糖尿病大鼠视网膜中琥珀酸含量较对照组增加(P＜0.01)，GPR91的表达并未出现明显差异。GPR91shRNA玻璃体腔注射可改善糖尿病大鼠视网膜微血管结构和功能的破坏。(2)体外实验:RGC-5细胞和原代神经节细胞经高糖/琥珀酸/低氧孵育，p-MAPK，COX-2，PGE2，C/EBPβ，C/EBPδ，c-Fos和VEGF表达均增加(P＜0.01)。转染GPR91 shRNA或siRNA后p-ERK, p-JNK, COX-2, PGE2, C/EBPβ, C/EBPδ,c-Fos和VEGF表达下调。ERK1/2抑制剂预处理后COX-2，PGE2，C/EBPβ，C/EBPδ,c-Fos和VEGF表达下调。COX-2抑制剂预处理后PGE2和VEGF表达下调;转染GPR91 shRNA后抑制共培养的RF/6A细胞增殖迁移能力(P＜0.01)。C/EBPβ siRNA转染细胞后VEGF表达下调;Luciferase和ChIP结果显示C/EBPβ调节VEGF的转录过程。 结论:早期糖尿病大鼠视网膜中琥珀酸蓄积;玻璃体腔注射GPR91 shRNA可改善视网膜微血管病变。GPR91通过ERK1/2/COX-2/PGE2通路调控VEGF的分泌进而调控高糖/琥珀酸孵育下内皮细胞的血管生成能力;GPR91可通过ERK1/2/CEB/Pβ通路调控缺氧条件下原代神经节细胞的VEGF转录。