纳米给药系统由于具有增大药物的吸收、控释药物释放、提高药物靶向性与稳定性、减少给药次数和剂量、降低毒副作用等显著优势,而在癌症治疗的研究中备受关注。将特异性抗体或配体修饰在纳米粒表面可使药物选择性地在靶组织或靶器官浓集,从而进一步增加靶细胞对药物的摄取,降低对正常细胞的毒副作用。研究表明,在急性髓系白血病HL60细胞表面特异性表达了CD33抗原,因此,可将抗CD33抗体作为靶向基团偶联于纳米粒表面,制备主动靶向纳米给药系统。利用体循环与细胞内部环境pH值的差异,选用pH敏感性材料作为药物载体,实现智能释药。本研究将疏水性小分子叶酸(FA)接枝到羧甲基壳聚糖(CMCS)的C2-NH2上,合成了两亲性高分子载体材料FA-CMCS.该载体材料能将疏水性药物包封于内自组装形成纳米粒,并能响应环境pH值而引起药物释放。在纳米粒表面偶联CD33抗体后,能准确靶向至HL60细胞。本课题的主要研究内容和结论如下：(1)以CMCS为原料,在EDC和NHS的联合催化作用下将FA接枝到CMCS的C2-NH2上,合成了两亲性高分子载体材料FA-CMCS。对原料和产物进行红外光谱和核磁共振图谱表征,证实了酰胺键的形成。调整反应物的质量配比,分别得到具有五种不同偶联率的FA-CMCS,采用紫外分光光度法测得FA偶联率分别为5.2%、9.3%、13.6%、19.7%和16.9%；改变反应物中CMCS的分子量后得到四种具有不同偶联率的FA-CMCS,分别为14.8%、15.6%、17.2%和19.7%。(2)采用芘荧光探针光谱法测得FA-CMCS的临界胶束浓度为0.1047mg/mL。以其为载药纳米材料,与模型药物(MTX)在水溶液环境下通过超声法自组装形成载药纳米颗粒,并把药物包封于内部,形成的纳米粒粒径大小分布均匀,分散性良好,结构紧致,呈现出较规则的球形,粒径大小为150nm左右,符合靶向制剂的要求。改变FA-CMCS的分子量,所形成的纳米粒粒径、Zeta电势和包封率随分子量的增加逐渐增大,但载药量却呈现出不规则的变化规律；改变反应体系中的药物浓度,随着浓度的减小,所形成的纳米粒平均粒径和Zeta电势基本不变,包封率逐渐增大,而载药量却逐渐降低。因此得到最佳载体CMCS分子量为250kDa,载体与药物的最佳反应浓度之比为15：1。(3)以载药纳米粒为基材,将抗CD33抗体偶联于载药纳米粒表面,制得主动靶向纳米粒,测定了抗体与纳米粒的偶联率、纳米粒对细胞的靶向性与靶点位置,以及纳米粒在体外的释药行为,并考察了抗体浓度对偶联率的影响,环境pH值以及载药量两个因素分别对纳米粒释药行为的影响。ELISA法所测定的样品抗体偶联率约为2.45：1,且随着反应体系中抗体浓度的减小,抗体的偶联率也相应降低。流式结果显示有多达92.9%的细胞表面存在抗体偶联的纳米粒,荧光显微镜也观测到荧光均匀分布在细胞表面,说明纳米粒对HL60细胞有良好的靶向性。对纳米粒的释放行为进行研究显示在pH7.4的环境中,18h后纳米粒的累计释药率不超过30%,而在pH5.6的环境中,18h后纳米粒的累计释药率高达75%,这证明纳米粒具有pH敏感释药性；另外,随着载药量减少,偶联纳米粒的累计释药率呈现出逐渐降低的趋势。因此,FA-CMCS能将疏水性药物包封于内自组装形成纳米粒,并能响应环境pH值而引起药物释放。在纳米粒表面偶联CD33抗体后,能准确靶向至HL60细胞。这种表面带有抗体的纳米给药系统有望应用于甲氨喋呤的体内传递,治疗急性髓系白血病。