【摘 要】
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目的：建立8J·cm-2紫外线A(UVA)辐射损伤永生化的人角质形成细胞株(HaCaT)细胞的病理模型，经由信号通路的表皮生长因子受体(EGFR)，磷脂酰肌醇-3激酶(AKT)，细胞周期蛋白(CyclinD1)至周期蛋白依赖激酶(4CDK-4)角度研究扇贝多肽(Polypeptidefrom Chlamys farreri，PCF)抑制UVA诱导HaCaT细胞凋亡的分子机制。 方法：采用琼脂糖凝
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目的：建立8J·cm-2紫外线A(UVA)辐射损伤永生化的人角质形成细胞株(HaCaT)细胞的病理模型，经由信号通路的表皮生长因子受体(EGFR)，磷脂酰肌醇-3激酶(AKT)，细胞周期蛋白(CyclinD1)至周期蛋白依赖激酶(4CDK-4)角度研究扇贝多肽(Polypeptidefrom Chlamys farreri，PCF)抑制UVA诱导HaCaT细胞凋亡的分子机制。
方法：采用琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡；RT-PCR法检测胞内表皮生长因子受体EGFR表达；RACE法构建EGFR的全长cDNA文库，基因测序观察EGFR经UVA辐射诱导后的变化；蛋白印迹法检测AKT,p-AKT,CyclinD1及CDK-4的蛋白表达水平。
结果：EGFR抑制剂AG1478和AKT抑制剂PHZ1023均可阻断UVA引起的细胞凋亡，1.42～5.68mmol.L-1范围内的PCF可剂量依赖性抑制UVA辐射后细胞内EGFR的表达量；EGFR经8J·cm-2UVA辐射1h后基因产生突变，而加入2.84mmol.L-1PCF孵育2h后可部分修复缺失的碱基片段；预先加入AG1478和PHZ1023则分别抑制UVA引起的AKT及CyclinD1，CDK-4蛋白水平的表达。
结论：PCF可以通过阻断EGFR-CDK-4通路来抑制UVA诱导的HaCaT细胞凋亡。
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