EBV相关胃癌p53基因过表达的研究

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目的 探讨EBV相关胃癌(EBV associated gastric carcinomas,EBVaGC)和与之匹配的EBV阴性胃癌(EBV negative gastric carcinomas,EBVnGC)p53蛋白的表达,以及EBV感染和p53蛋白表达在胃癌发生发展中的作用。方法 应用PCR-Southern技术检测185例胃癌及相应癌旁组织EBVDNA,对阳性标本进一步用原位杂交法检测EBV编码的小RNA(EBERs),证实EBV感染的存在,将胃癌分成EBVaGC和EBVnGC两组。应用免疫组化抗原热修复技术检测13例EBVaGC、45例临床指标与之匹配的EBVnGC以及58例相应癌旁组织p53蛋白的表达;RT-PCR检测EBV相关基因的表达。结果 ① 185例胃癌组织中有13例为EBVaGC,EBV阳性率为7. 03%;而癌旁组织均为阴性,两种组织中EBV阳性率有显著性差(X2=11. 0709,P=0. 0009) 。② 胃癌组p53蛋白阳性率为86. 2%(50/58) ;癌旁组织组p53蛋白均为阴性。胃癌组p53蛋白阳性率明显高于癌旁组织组,两组之间有极显著性差异(P=0. 0000) 。③ EBVnGC p53蛋白阳性率为86. 7%(39/45) ,p53蛋白过表达为57. 8%(26/45) ;EBVaGC p53蛋白阳性率为84. 6%(11/13) ,p53蛋白过表达仅为15. 4%(2/13) 。两组之间p53蛋白的阳性检出率无明显差异(P=0. 7912) ,但EBVaGC组p53蛋白过表达率明显低于EBVnGC组,两组之间有显著性差异(P=0. 0085) 。④ 13例EBVaGC核抗原基因EBNA1均为阳性,潜伏膜蛋白基因LMP1均为阴性,即刻早期基因BZLF1阳性率为46. 2(6/13) 。结论 ① 胃癌组织中p53蛋白阳性率明显高于癌旁组织,提示p53蛋白表达与胃癌的发生有关。② EBVaGC和EBVnGC组织中p53蛋白表达无明显差异,但EBVnGC组织中p53蛋白的过表达明显高于EBVaGC,提示EBV感染与p53蛋白的异常表达有关。③ 个别EBVaGC组织中仅有少量癌细胞EBER阳性,且呈局限性分布,可能与胃癌发生后EBV的继发感染有关。④ EBV编码蛋白可通过不同途径与p53基因或蛋白相互作用,参与胃癌的发生和发展。⑤ p53蛋白阳性表达在EBVaGC组以数量不等伴微弱到中等程度的非均匀核阳性为主,提示p53基因的非突变机制;而在EBVnGC组则表现为绝大部分癌细胞强且均匀的核染色,代表了p53基因的突变机制。
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