人参发根抗氧化、抗皮肤癌及抗紫外线作用研究

来源 :吉林农业大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:zx350220519
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癌症严重威胁人类健康,每3例确诊癌症病例中有1例是皮肤癌,全世界每年发生200多万例皮肤癌病例,其中恶性黑色素瘤的死亡率极高。紫外线的辐射是皮肤癌发生的重要因素之一。随着臭氧层的破坏,越来越多的紫外线到达地面,人体长期暴露在紫外光下尤其是中波紫外线(UVB),会引起皮肤衰老、DNA损伤、光老化甚至癌变。目前人参有效成分抗肿瘤、抗紫外线的研究已成为热点。但人参及其提取物中的重金属、农药和溶剂残留等会带来安全风险,人参生长过程缓慢且大面积占用森林土地,为解决伐林栽参、老参地问题,科研人员以人参茎叶为外植体诱导出人参发根,工厂化生产人参皂苷。人参发根研究多集中于发根诱导、培养条件优化、生产次生代谢产物。尚未发现人参发根抗黑色素瘤、抗紫外线的作用研究。所以本实验选择富含人参皂苷、多糖、氨基酸有效成分,而无农药、无重金属及质量稳定的人参发状根及其培养液为原料,首先,通过HPLC、苯酚-硫酸法,对其有效成分进行测定;其次,采用Cu2+螯合能力、PPO、FRAP三种方法对人参发根进行抗氧化功效评价;再次,对人参发根的体外抗黑色素瘤活性进行研究;最后,依据功效评价结果,研制一款具有护肤作用的人参发根护肤液,对其抗紫外线功效、机理进行研究,以期为人参发根药理作用进一步研究及其应用,提供理论依据和参考。实验结果如下:1、人参发根抗氧化能力显著,随着浓度的增大,人参发根的Cu2+螯合率逐渐接近VC,在100 mg/mL时人参发根的Cu2+螯合率与VC差异不显著(P>0.05);人参发根与VC有相同的酶活力清除趋势,40-100 mg/mL时两者差异不显著(P>0.05);人参发根的总抗氧化能力在100 mg/mL时达到0.8774 mmol FeSO4/g。2、人参发根抑制黑色素瘤A375细胞增殖(P<0.05);抑制A375细胞中TYR的活性(P<0.05);使细胞中黑色素生成减少;降低细胞迁移、侵袭能力;和对照组相比人参发根组、人参组及达卡巴嗪组均出现明显的凋亡细胞,人参发根组较人参组和达卡巴嗪组晚期凋亡率高(P<0.05),其机理是将皮肤癌细胞的周期阻滞在S、G2/M期实现的。人参发根促进人皮肤角质层细胞HaCaT增殖,促进细胞划痕愈合,对HaCaT细胞起到保护作用效果强于人参(P<0.05),达卡巴嗪因对HaCaT细胞产生细胞毒性作用进而抑制细胞增殖。3、人参发根护肤液的制备工艺:取90mL去离子水加入5mL甘油、5mL丙二醇搅拌均匀,加入0.1g透明质酸钠混匀后在高速搅拌下缓慢加入0.1g卡波姆,用10%氢氧化钠调节pH,作为基质,与人参发根醇提物配制成10 mg/mL的人参发根护肤液。4、人参发根提高了小鼠皮肤中Hyp含量、GSH-Px活性,降低MDA含量,增加CAT、SOD活力(P<0.05);人参发根组小鼠皮肤中IL-6、TNF-α含量均减少,以人参发根高剂量组最好(P<0.05);人参组、人参发根中、高剂量组有效改善UVB所致的小鼠皮肤损伤、脱屑现象,降低小鼠表皮层厚度,减少炎性浸润及角质层过度角化,保护胶原纤维;模型组小鼠皮肤中的MMP-1、MMP-3蛋白表达水平显著高于正常对照组(P<0.05),人参组、人参发根低、中、高剂量组MMP-1、MMP-3蛋白表达水平显著下降(P<0.05)。
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