论文部分内容阅读
厚朴来源于木兰科植物厚朴Magnolia officinalis Rehd.et Wils.或凹叶厚朴Magnolia officinalis Rehd.et Wils.var.Biloba Rehd.et Wils.的干燥干皮、根皮及枝皮。收载于2015年版《中国药典》一部,临床上广泛应用于治疗抑郁症、肠梗阻、慢性肝炎及缓解更年期等症状。厚朴药用价值显著,很多经典方剂如大承气汤、厚朴温中汤中都含有厚朴。厚朴资源分布较广,在四川西南部、湖北西部、陕南及甘南等地均有其分布。四川作为厚朴的主产区之一,其出产的厚朴被统称为“川朴”,为传统的道地药材。川朴资源遍及四川都江堰市、乐山市、阿坝州、峨眉山市、眉山、雅安等多个地区。目前有关厚朴的种质资源、化学成分、药理作用及质量控制等已有较多相关报道,但对于川产厚朴品质质量的系统研究及综合评价还未见报道。鉴于此,本文拟开展以下几方面的研究工作:第一、建立川产厚朴药材HPLC指纹图谱:采集四川不同地区厚朴药材样品42批,通过优化供试品制备方法及色谱分析条件,建立了分离度良好的厚朴药材HPLC指纹图谱测定方法。对其指纹图谱共有峰进行归属,确定了9个共有峰。以对照品的相对保留时间和在线收集的紫外光谱图为依据,指认厚朴HPLC指纹图谱中1号峰、5号峰、8号峰、9号峰分别为紫丁香苷、木兰花碱、和厚朴酚、厚朴酚。通过对42批厚朴样品指纹图谱进行相似度评价及聚类分析,发现其指纹图谱相似度均在0.8以上,显示四川不同地区厚朴化学成分组成差异较小;聚类分析结果表明,除都江堰龙池镇虹口景区观风沟和峨眉山市符溪镇丰收村两个产地外,其余样品聚类相对较好。结果表明本文建立的HPLC指纹图谱的方法科学、合理,可用于川产厚朴药材的一致性研究。第二、川产厚朴挥发油成分的鉴别与分析:采用《中国药典》(2015年版)挥发油测定法“甲法”测定厚朴中挥发油含量,运用GC-MS法鉴别42批厚朴药材中挥发油成分组成。从挥发油提取得率分析可知,眉山市洪雅县张村与峨眉山市龙池镇红花村厚朴含油量均较高,含量为0.4%;而峨眉山市符溪镇丰收村和乐山市夹江县黄土镇黄坪村挥发油含量偏低,仅为0.17%。表明四川不同地区厚朴药材中挥发油含量差异较大。从挥发油成分分析可知,42批厚朴药材挥发油中共确定了153个化学成分,主要为萜烯类、萜醇类、倍半萜类、高级脂肪烷烃类以及含氧衍生物等。其中5种化合物为各批厚朴药材共有成分,分别为1-石竹烯,α-石竹烯,α-衣兰油烯,12-Oxabicyclo[9.1.0]dodeca-3,7-diene,1,5,5,8-tetramethyl-,(1R,3E,7E,11R)-,2-Naphthalenemethanol,1,2,3,4,4a,5,6,7-octahydro-a,a,4a,8-tetramethyl-,(2R,4aR)-。表明四川不同地区厚朴挥发油类成分含量及组成差异较大。第三、川产厚朴活性成分含量测定:采用HPLC、酸碱滴定法、分光光度法分别测定42批厚朴药材中酚类、生物碱类、多糖类、苯丙醇苷类等成分含量。结果其厚朴酚含量为8.5636.41mg·g-1,和厚朴酚含量为5.2929.17mg·g-1。厚朴酚、和厚朴酚总量为14.3665.58 mg·g-1;紫丁香苷、木兰花碱的含量分别为0.01%0.22%,0.01%0.21%;总生物碱含量为2.71986.9111mg·g-1;多糖的含量为3.89%21.51%。表明四川不同地区厚朴药材中各化学成分含量差异较为显著。第四、建立川产厚朴药材化学质量的综合评价-灰色关联分析法:采用灰色关联分析法,以供试药材中厚朴酚、和厚朴酚、挥发油、总生物碱、多糖、紫丁香苷、木兰花碱及厚朴酚、和厚朴酚总量为评价指标,对川产厚朴药材的化学质量进行综合评价。结果42批药材的相对关联度在0.2820.597之间,说明四川不同地区厚朴药材的化学质量差异较大。最后,对厚朴化学成分、种质资源研究进展进行了综述。本文研究结果为川产厚朴品质质量综合评价、良种选育及药用资源的保护及开发利用等提供了一定的科学依据。