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研究背景与目的:卵巢癌(Epithelial ovarian cancer,EOC)是全世界范围内死亡率最高的女性生殖道恶性肿瘤,约占卵巢恶性肿瘤的85%到90%。由于早期症状不典型及筛查方法的缺乏,70%以上患者诊断时已为晚期。尽管对卵巢癌治疗的研究不断有新进展,但收效甚少,晚期卵巢癌患者的五年生存率仍为30%左右。研究证实,免疫治疗是近年来基础研究和动物研究的一种有前景的治疗策略,而EOC作为免疫原性肿瘤或可从中获益。研究发现程序性死亡配体-1(PD-L1)、吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO1)及芳香烃受体(AHR)在包括卵巢癌在内的多种恶性肿瘤中存在高表达,与肿瘤的免疫逃逸、不良预后相关,因此抑制其表达和活性可能改善卵巢癌免疫抑制情况,改善预后。莱菔子素(SFN)是莱菔子中存在的一种天然异硫氰酸酯化合物,研究证实其能抑制人类癌症中多种致癌信号通路,包括核因子-κB(NF-κB)、苏氨酸蛋白激酶(Akt)以及各种存活通路蛋白。但其能否通过My D88/NF-κB通路下调卵巢癌PD-L1、IDO1及其下游因子AHR的表达尚需进一步探讨。本实验将对莱菔子素对人卵巢癌细胞PD-L1、IDO1、AHR m RNA表达及IDO1活性的影响进行研究。研究方法:1.利用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测不同浓度的SFN作用不同时间后My D88+OVCAR-3细胞和My D88-A2780细胞PD-L1、IDO1、AHR m RNA的表达情况;2.使用比色法检测加药前后My D88+OVCAR-3细胞和My D88-A2780细胞上清犬尿氨酸(Kyn)浓度变化。研究结果:1.OVCAR-3、A2780细胞均表达PD-L1、IDO1、AHR,且在OVCAR-3细胞中的表达明显高于A2780细胞;2.莱菔子素下调OVCAR-3细胞PD-L1的表达,呈浓度依赖性,其中以10μmol/L作用6小时后下调最明显,且能抑制紫杉醇(PTX)诱导的PD-L1表达;3.莱菔子素下调OVCAR-3细胞IDO1的表达,呈时间依赖性,其中以作用12小时后下调最明显,且能抑制PTX诱导的IDO1表达;4.莱菔子素下调OVCAR-3细胞AHR的表达,呈时间依赖性,其中以作用12小时后下调最明显,且能抑制PTX诱导的AHR表达;5.莱菔子素减少OVCAR-3和A2780细胞分泌Kyn。结论:1.OVCAR-3细胞存在PD-L1、IDO1、AHR的高表达,可能与卵巢癌的免疫逃逸相关;2.SFN抑制PD-L1、IDO1、AHR m RNA转录,但对三者的最佳作用时间及最佳浓度有差异,SFN与PTX联用时能抑制PTX诱导的PD-L1、IDO1、AHR表达,可增强My D88+EOC细胞对PTX的反应;3.SFN能减少OVCAR-3细胞分泌犬尿氨酸,与1-甲基色氨酸(1-methyl tryptophan,1-MT)联用后Kyn的分泌比单用SFN减少明显,说明使用1-MT的同时使用TLR-4/My D88通路上游抑制剂能起到协同抑制IDO1的作用,对临床可能有积极意义;4.SFN能改善卵巢癌免疫抑制状态,尤以OVCAR-3细胞最为显著,通过抑制卵巢癌的免疫逃逸作用可能改善卵巢癌患者预后。