蛋壳形成过程中超微结构及钙沉积相关基因表达的研究

来源 :石河子大学 | 被引量 : 7次 | 上传用户:ccyyttaa
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禽类蛋壳是保护蛋的内容物不受损害和减少蛋在保存、包装和运输中的破损的一个重要影响因素。本研究以产蛋鸡为研究对象,在蛋进入子宫的不同时间段屠宰蛋鸡取其蛋壳及其子宫,采用X射线能谱仪、电子扫描显微镜来探寻蛋壳的元素组成,观察其内外表面超微结构,将蛋进入子宫前后不同期的子宫,运用Trizol法提取其总RNA,并反转录成cDNA,利用荧光定量RT-PCR分别对蛋壳钙化相关的基因钙结合蛋白d28K(Calbindin-D28k)、骨桥蛋白(OPN)、钙离子ATP酶(CAATP)、碳酸酐酶(CA)、卵白蛋白(OV)在子宫中的不同时间段的表达规律进行分析研究,并结合各种基因的表达丰度,分析与蛋壳钙化密切相关的基因,为进一步研究其与蛋壳钙化,钙沉积的关系寻找依据。由本实验分析得出以下几个结果:1.本文用X射线能谱仪和扫描电镜来探寻蛋壳的元素组成、超微结构与蛋壳形成过程中钙沉积的关系。得出在蛋形成的过程中钙沉积越来越多,在蛋进入子宫前1h到蛋进入子宫后5h时间段钙沉积的最多,之后钙沉积的量越来越少。2.采用real-time PCR对OPN.OV在子宫中的不同时间段的表达规律进行分析,检测出在蛋进入子宫前2h、蛋进入子宫前1h、蛋进入子宫后5h OPN、OV的表达量逐渐升高,之后在蛋进入子宫后15h、产蛋后1h、产蛋后2h又逐渐下降。3.对CAATP在子宫中的不同时间段的表达规律进行分析,检测出在蛋进入子宫前2h、蛋进入子宫前1h、蛋进入子宫后5h、蛋进入子宫后15h、产蛋后1h CAATP的表达量逐渐升高,在产蛋后2h又逐渐下降。对Calbindin-D28k在子宫中的不同时间段的表达规律进行分析得出,在蛋进入子宫前2h、蛋进入子宫前1h、蛋进入子宫后5h、蛋进入子宫后15h Calbindin-D28表达量逐渐升高,之后在产蛋后1h、产蛋后2h又逐渐下降对CA在子宫中的不同时间段的表达规律进行分析得出,在蛋进入子宫前2h、蛋进入子宫前1h、蛋进入子宫后5h CA的表达量逐渐升高,之后在蛋进入子宫后15h、产蛋后1h、产蛋后2h又逐渐下降。4.本研究表明OPN、OV是影响蛋清形成的关键基因,而CAATP.Calbindin-D28、CA是影响钙沉积的关键基因。
其他文献
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