Na<'+>/H<'+>逆向转运蛋白基因ThNHX1和AtNHX2在转基因水稻中的表达与功能分析

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Na+/H+逆向转运蛋白(Na+/H+antiporter,NHX)广泛存在于植物之中,具有抗盐功能。本文所研究的Na+/H+逆向转运蛋白基因ThNHXl来自小盐芥(Thellungiellahalophila),AtNHX2来自拟南芥(Arabidopsisthaliana),具有典型的NHX蛋白功能区域。本研究用ThNHX1cDNA和AtNHX2cDNA转化水稻(Oryzasativa),获得转基因植株,研究这两个NHX基因在水稻中是否具有抗盐作用。 采用的含ThNHX1cDNA的载体pSSZNHX1带有潮霉素抗性基因,而含AtNHX2cDNA的2个载体pBANHX2和pSSZNHX2分别带有抗除草剂Basta基因和潮霉素抗性基因。利用农杆菌介导的转化方法将它们转入水稻,对转基因植株进行了PCR,northernblot等分子生物学鉴定,分析了转基因植株后代对不同浓度NaCl的耐受能力。在40个PCR检测呈阳性的转基因株系(其中pSSZNHX1品系9株;pSSZNHX2品系6株;pBANNHX2品系25株)中,有15个株系通过northernblot检测到NHX基因的表达。抗盐生理试验发现,在150mMNaCl溶液中处理14天,野生型水稻均死亡,而转基因植株的生长只是受到轻微阻抑。这些结果表明,在转基因水稻中表达的ThNHX1和AtNHX2对提高水稻抗盐性具有一定的作用。
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