实验目的：多胺是一种长链脂肪族化合物，通常我们说的多胺指的是腐胺(putrescine，Put)、精胺(spermine，spm)和精脒(亚精胺)(spermidine，spd)。多胺广泛存在于自然界，是大多数生命器官所必需的。生理性多胺在人体组织和体液中的含量非常少，而在肿瘤组织中多胺含量比正常组织中高很多且与肿瘤的生长有关。本实验通过外加多胺来模拟人体高、正常（中）和低三种不同多胺微环境对肝癌细胞生长、侵袭、转移等能力及相关分子机制的研究。实验方法：选取人肝癌细胞HepG2作为研究对象，使用基因转染技术把Akt3基因转到HepG2细胞中。把外源性多胺按高多胺浓度为腐胺0.8nmol/mL、精脒10.0nmol/mL、精胺5.0nmol/mL；正常多胺浓度为腐胺0.08nmol/mL、精脒1.0nmol/mL、精胺0.5nmol/mL；低多胺浓度为腐胺0.008nmol/mL、精脒0.1nmol/mL、精胺0.05nmol/mL三组分别加入HepG2细胞和HepG2-Akt3细胞中，分别培养15天和30天。每种细胞另设阴性对照。通过运用克隆形成能力实验来检测不同多胺浓度对两种不同细胞增殖能力的影响；应用Transwell迁移实验（未铺胶）来检测不同多胺浓度对两种不同细胞迁移能力的影响；运用细胞划痕实验来检测不同多胺浓度对两种不同细胞伤口愈合能力的影响；运用蛋白免疫印迹实验（Western blot）来分析不同多胺微环境对与肿瘤细胞粘附、迁移、侵袭等相关的各种蛋白表达的影响，如鸟氨酸脱羧酶(ODC)、精脒/精胺乙酰转移酶(SSAT)、AKT、P27kip1、低氧诱导因子(HIF1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、钙粘附蛋白（E-cadherin）、整合素（Integrinα6）、Akt3、组织蛋白酶D（Cathepsin D）等蛋白的变化。实验结果：未转染Akt3的HepG2细胞在不同多胺微环境下显示了不同的增殖、迁移、侵袭能力且随着多胺浓度的升高其增殖、迁移、侵袭能力逐渐增强，并成时间剂量依赖性。转染AKt3的HepG2细胞在不同多胺环境下同样显示了不同的增殖、迁移、侵袭能力且随着多胺浓度的升高其增殖、迁移、侵袭能力逐渐增强，并成时间剂量依赖性。且转染AKt3的HepG2细胞在相同多胺浓度的情况下其增殖、迁移、侵袭能力比未转染HepG2细胞要强。蛋白免疫印迹实验结果表明多胺是通过诱导AKt3蛋白、低氧诱导因子(HIF1α)蛋白、鸟氨酸脱羧酶(ODC)、精脒/精胺乙酰转移酶(SSAT)、血管内皮生长因子(VEGF)、整合素（Integrin α6）、组织蛋白酶D（Cathepsin D）蛋白的上调以及P27kip1蛋白、上皮钙粘附蛋白（E-cadherin）蛋白的下调来实现肿瘤细胞的高侵袭、高转移和增殖过快的过程。结论：多胺能够促进HepG2细胞、HepG2-Akt3细胞增殖、侵袭、转移，且转染过Akt3基因的HepG2细胞的增殖、侵袭、转移能力强于未转染Akt3的HepG2细胞。说明Akt3基因在多胺促进肿瘤发展过程中具有重要作用。