为了探明施用甘蔗糖厂酒精废液对土壤生物群落的影响,为科学施用甘蔗糖厂酒精废液提供科学依据,本研究利用传统的分离培养方法及PCR-DGGE分子标记技术,对在不同甘蔗糖厂酒精废液处理条件下甘蔗各个生育时期的蔗田微生物数量及成熟期微生物群落DNA序列进行了分析,得到不同处理条件下的土壤微生物数量和DNA序列的多样性之间的差异,并对影响土壤微生物群落的因素进行了探讨。本研究获得的主要结论如下:1.在甘蔗生育期内,施用酒精废液的处理土壤中细菌、真菌、放线菌及微生物总数均比不施酒精废液的处理有明显增加。2.比较了两种不同的土壤DNA提取方法,发现直接法的提取效率较高,且产量也高,为后期试验提供良好的DNA模板。3.对目的基因的PCR扩增进行了优化,由于采用特殊的带有“GC夹板”结构的引物,所以分别采用常规PCR及降落式PCR对16S-rDNA V3区进行扩增,结果显示,降落式PCR方法在扩增中具有明显的优势,不但提高了对目的产物扩增的特异性,同时也使产量得以提高。4.土壤微生物物种丰富度次序由高到低的顺序为:75t/ha酒精废液＞105t/ha酒精废液＞4St/ha酒精废液＞CK2＞CK1＞75t/ha酒精废液+不种处理,各处理土壤间微生物群落相似性指数以45t/ha与75t/ha酒精废液处理的最高,达41%;75t/ha酒精废液+不种与CK2、CK1与105t/ha酒精废液处理之间的最低,为19%。UPGMA聚类也显示了类似的结果,75t/ha和45t/ha酒精废液的处理相似性达75%。5.施用酒精废液处理对蔗田土壤微生物的影响总体上是有利的,可使蔗田土壤细菌多样性更丰富,数量更多,有利于改良土壤结果,提高土壤肥力。