鸡源益生地衣芽胞杆菌的分离、筛选及产酶特性研究

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:achm207
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地衣芽胞杆菌作为益生菌被广泛应用于动物生产,具有调节肠道微生物群使其达到动态平衡的作用,同时参与肠道内物质代谢,增强免疫力和抗应激能力。因此适合作为益生菌添加到动物饲料中。本研究拟分离筛选出鸡源的具有良好益生特性及产酶特性的地衣芽胞杆菌,为开发具有自主知识产权的高效动物微生态制剂奠定基础。本论文主要进行了三个方面的研究:菌株分离鉴定、生物学特性研究、产酶特性研究。主要研究结果如下:以采集的健康鸡粪作为菌种来源,采用加热处理分离出20株疑似菌株,依据伯杰氏手册中地衣芽胞杆菌的特征,结合菌落特征、菌体形态、生理生化试验、16S rRNA序列分析的方法鉴定出8株地衣芽胞杆菌。通过抑菌试验和生长能力测定比较,选取性能较优的菌株HDRaBLp与HDRaBLt做进一步生物学特性研究,包括对胃酸、胆盐和高温的耐受能力。结果表明HDRaBLp与HDRaBLt都具有很强的抗逆性能,能耐受pH 2.0的胃酸,可在0.3%的胆盐浓度下存活,能耐受90℃的高温。选择HDRaBLp与HDRaBLt株芽胞杆菌,首先定性检测其产蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶的能力,发现均具有产蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶能力;其次,定量检测了菌株在菜粕、豆粕、麸皮、棉粕四种常用的饲料原料固体培养条件下产蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶能力,发现菌株均具有较强的产酶能力,其中,HDRaBLp在菜粕中培养产纤维素酶能力最强,在麸皮中培养产淀粉酶能力最强,在豆粕中培养产蛋白酶能力最强;HDRaBLt在豆粕中培养产纤维素酶能力最强,在棉粕中培养产淀粉酶能力和产蛋白酶最强;最后,进一步研究两株菌对于菜粕、豆粕、麸皮、棉粕四种常用的饲料的消化效果。研究发现,两株地衣芽胞杆菌作用后还原糖含量增加显著,增量在60.00%以上,其中两株菌对麸皮饲料具有较好的处理效果,还原糖分别增加257.74%(HDRaBLp)、220.18%(HDRaBLt);两株地衣芽胞杆菌作用后可溶性蛋白含量增加较为明显,其中两株菌对菜粕有较好的处理效果,可溶性蛋白分别增加了160.00%(HDRaBLp)和80.00%(HDRaBLt);两株地衣芽胞杆菌对饲料蛋白质具有较好的降解效果,处理后游离氨基酸浓度明显上升,游离氨基酸增加量折算成饲料蛋白消化率,降解成氨基酸的蛋白质达到3.52~10.07mg/g。两株菌对豆粕和麸皮饲料处理效果较好,消化蛋白分别为8.43mg/g(HDRaBLp对于豆粕)、7.42mg/g(HDRaBLp对于麸皮)、10.07mg/g(HDRaBLt对于豆粕)、7.30mg/g(HDRaBLt对于麸皮)。两株菌作用后物质损失率也较低,其中棉粕组最低,两株菌分别为1.71%(HDRaBLp)和4.14%(HDRaBLt)。综合以上结果表明,地衣芽胞杆菌HDRaBLp和HDRaBLt对于饲料营养的消化吸收具有进作用一定的促进作用,并且,HDRaBLp比HDRaBLt更适用于作为饲料添加剂。
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