骨松康膏方治疗肾阳虚型老年性骨质疏松症的临床观察和网络药理学研究

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目的:(1)研究观察骨松康膏方治疗肾阳虚型老年性骨质疏松症的临床疗效及安全性;(2)基于网络药理学的方法进一步探讨骨松康膏方治疗老年性骨质疏松症可能的药效物质基础和作用机制。方法:(1)选取2018年12月至2019年09月广西中医药大学附属瑞康医院骨脊柱二区门诊或住院病人中符合纳入标准的肾阳虚型老年性骨质疏松症的患者72例,将其随机分为对照组和治疗组,每组各36例。治疗组选择口服骨化三醇胶丸+中药“骨松康”膏方;对照组口服骨化三醇胶丸+仙灵骨葆胶囊,治疗周期为3个月。疗程结束后对两组患者治疗前后肾阳虚中医症候积分、中医临床疗效、骨代谢指标(血钙、骨碱性磷酸酶)和骨密度进行组内及组间疗效比较及统计学分析。(2)通过中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)筛选出骨松康膏方组方药物的主要活性成分及其作用靶点;通过Gene Cards、OMIM数据库筛选出骨质疏松症的疾病靶点;运用Venny平台将骨松康膏方药物调控的靶点与骨质疏松症疾病作用靶点取交集,得到骨松康膏方治疗骨质疏松症的作用靶点;通过STRING在线平台构建共同靶点PPI网络;通过Cytoscape软件构建药物-活性成分-疾病-靶点互作网络;通过R语言软件应用Bioconductor-cluster Profiler R包对共同靶点进行基因功能(GO)分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果:(1)本次临床观察研究显示,骨松康膏方与仙灵骨葆胶囊均能有效降低老年性骨质疏松症患者肾阳虚型中医症候积分,两者差异无统计学意义(P>0.05);在中医临床疗效方面,二者均有良好的治疗效果,差异无统计学意义(P>0.05);在骨代谢方面,二者均不能有效提高患者血钙水平,差异无统计学意义(P>0.05);骨松康膏方较仙灵骨葆胶囊能有效提高患者骨碱性磷酸酶水平,差异有统计学意义(P<0.05);在骨密度方面,二者均不能在短期内改善患者腰椎骨密度水平,差异无统计学意义(P>0.05)。在安全性方面,治疗3月后两组患者均未出现明显肝肾功能损害,无明显毒副作用。(2)(1)从TCMSP数据库中共筛选得到骨松康膏方组方药物有效生物活性成分86个,935个作用靶点。(2)从Gene Cards、OMIM数据库筛选得到骨质疏松症相关靶点1026个,通过韦恩图得到骨松康膏方药物与疾病共同靶点63个,这些靶点主要包括白介素-6(IL-6),核转录因子(JUN),蛋白激酶(AKT1),丝裂原活化蛋白激酶(MAPK1),雌激素受体基因(ESR1)等。(3)GO功能富集分析显示生物学过程主要涉及对类固醇激素的反应、对活性氧的反应等;分子功能主要涉及核受体活性、转录因子活性、类固醇激素受体活性、细胞因子受体结合等;细胞组分主要涉及细胞外基质、胶原蛋白、核染色质等;KEGG通路富集分析,共富集出119条信号通路,富集基因较多的通路主要有AGE-RAGE信号通路、IL-17信号通路、TNF信号通路、雌激素信号通路、HIF-1信号通路、松弛素信号通路、PI3K-Akt信号通路等。结论:(1)骨松康膏方治疗肾阳虚型老年性骨质疏松症具有良好的治疗效果,治疗3个月其临床疗效与仙灵骨葆胶囊相当,并且能有效的提高患者骨碱性磷酸酶水平,具有促进成骨细胞分化的功能,安全无明显不良反应,可进一步临床推广应用。短期内两组患者骨密度水平均未见明显变化,需要长期的随访,进一步观察研究。(2)本研究通过网络药理学的方法初步验证表明骨松康膏方治疗骨质疏松症具有多成分、多靶点、多通路的作用特点,预测了其可能的作用靶点和作用机制,为进一步的实验研究提供理论依据。
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