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第一部分:PM2.5对人支气管上皮细胞氧化应激-JAK2/STAT3信号通路的影响目的:探讨PM2.5通过氧化应激对人支气管上皮细胞JAK2/STAT3信号通路和细胞因子的影响,为研究PM2.5引起呼吸系统疾病的发生机制提供新思路。方法:利用传统浸入式方法培养支气管上皮细胞16HBE,用PM2.5和氧化应激干扰剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)处理16HBE细胞后测定细胞内ROS水平、GSH:GSSG比值、JAK2、STAT3的基因和蛋白表达;用PM2.5、NAC和AG490(JAK抑制剂)处理16HBE细胞后检测细胞上清液中IL-6、IL-8的含量及COX-2的蛋白表达。结果:1、染毒12h和24 h后,50μg/ml PM2.5组和100μg/ml PM2.5组16HBE细胞内ROS水平高于生理盐水对照组,GSH:GSSG比值低于生理盐水对照组,PM2.5暴露+NAC保护组ROS水平低于各自PM2.5暴露组,而PM2.5暴露+NAC保护组GSH:GSSG比值高于各自PM2.5暴露组,且差异均有统计学意义(P<0.05)。2、染毒12h和24 h后,50μg/ml PM2.5组和100μg/ml PM2.5组16HBE细胞内JAK2、STAT3基因和蛋白表达均高于生理盐水对照组,PM2.5暴露+NAC保护组JAK2、STAT3的基因和蛋白表达均低于各自PM2.5暴露组,且差异均有统计学意义(P<0.05)。3、100μg/ml PM2.5组上清液中IL-6、IL-8含量及COX-2蛋白表达量高于生理盐水对照组,5mmol/L NAC组,6μmol/L AG490组,100μg/ml PM2.5+5mmol/L NAC组,100μg/ml PM2.5+6μmol/L AG490组,且差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:PM2.5能对支气管上皮细胞造成氧化损伤,并可能通过氧化应激调节支气管上皮细胞JAK/STAT信号通路和相关细胞因子的产生。第二部分:PM2.5对人支气管上皮细胞IL4R-JAK3/STAT6-Eotaxin信号通路的影响目的:探讨PM2.5对人支气管上皮细胞JAK3/STAT6信号通路和细胞因子的影响,为PM2.5引起的呼吸系统疾病的发生机制提供新思路。方法:利用传统浸入式方法培养支气管上皮细胞16HBE,用PM2.5和IL-4处理16HBE细胞后测定16HBE细胞IL-4Rα蛋白的表达、JAK3和STAT6蛋白基因的表达情况;用PM2.5、IL-4和AG490处理16HBE细胞后测定细胞内Eotaxin的含量。结果:1、50μg/ml PM2.5和100μg/ml PM2.5剂量组IL-4Rα蛋白的表达高于生理盐水对照组且差异均有统计学意义(P<0.05),PM2.5和IL-4共同染毒组的IL-4Rα蛋白的表达高于IL-4单独染毒组,且差异均有统计学意义(P<0.05)。2、50μg/ml PM2.5+10ng/ml IL-4组,100μg/ml PM2.5+10ng/ml IL-4组JAK3蛋白和基因表达、STAT6蛋白和基因表达高于生理盐水对照组和10ng/ml IL-4组,且差异均有统计学意义(P<0.05)。3、100μg/ml PM2.5+10ng/ml IL-4组Eotaxin含量高于生理盐水对照组、10ng/ml IL-4组、10ng/ml IL-4+6μmol/L AG490组、10ng/ml IL-4+6μmol/L AG490+100μg/ml PM2.5组,且差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:JAK3/STAT6信号通路参与调控PM2.5对支气管上皮细胞Eotaxin的影响。