【摘 要】
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目的:胃癌的发病率和死亡率一直居高不下,其中胃腺癌的发生率占胃恶性肿瘤的95%,是胃癌组织学类型中最多见的一种。目前长链非编码RNA参与胃腺癌的发病机制已被证实。本研究旨在通过发现一全新的长链非编码RNA,探究其在胃腺癌组织和细胞株中的表达并结合样本所对应的临床病理资料,在分子层面初步揭示其在胃腺癌的发病机制中所发挥的功能,寻找全新的胃癌早期诊断的体外检测标志物及胃癌靶向治疗潜在的靶点。方法:（1
【基金项目】
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联勤保障部队第九〇〇医院胃癌创新团队基金（No.2014CXTD04）; 福建省自然科学基金（2017J01215）
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目的:胃癌的发病率和死亡率一直居高不下,其中胃腺癌的发生率占胃恶性肿瘤的95%,是胃癌组织学类型中最多见的一种。目前长链非编码RNA参与胃腺癌的发病机制已被证实。本研究旨在通过发现一全新的长链非编码RNA,探究其在胃腺癌组织和细胞株中的表达并结合样本所对应的临床病理资料,在分子层面初步揭示其在胃腺癌的发病机制中所发挥的功能,寻找全新的胃癌早期诊断的体外检测标志物及胃癌靶向治疗潜在的靶点。方法:（1）根据本科研团队前期利用高通量表达谱芯片技术对胃腺癌和相应的癌旁组织进行检测,得到差异表达的lncRNAs,结合lncRNA差异表达的倍数等信息,初步筛选出未被国内外文献报道过的lncRNA作为目标lncRNA。（2）通过实时荧光定量PCR（RT-qPCR）技术验证所筛选出的目标lncRNA在89对胃腺癌和相应的癌旁组织,以及胃腺癌细胞株中的表达情况,评价结果与芯片表达谱是否一致。（3）初步选定两株目标lncRNA低表达的细胞株,利用慢病毒构建目标lncRNA的过表达载体,使靶细胞呈现较慢病毒感染前2倍以上的表达量。（4）通过细胞功能和动物实验测定评价目标lncRNA对胃腺癌细胞包括侵袭、转移等生物学行为的影响。结果:（1）从前期芯片表达谱中筛选出目的lncRNA RP3-333A15.1,通过qPCR技术扩大样本量验证了RP3-333A15.1在89对胃腺癌及癌旁组织的表达情况,显示目的lncRNA下调表达率为78.7%（70/89）,为显著下调表达,差异具有统计学意义（p0.05）,而与相应患者的肿瘤大小、有无脉管侵犯的相关性具有统计学差异（P<0.05）。（3）LncRNA RP3-333A15.1在体外胃腺癌细胞株SGC-7901和MGC-803中过表达显著抑制其转移、增殖等生物学行为。通过裸鼠皮下荷瘤实验证实了lncRNA RP3-333A15.1具有体内抑制胃腺癌细胞SGC-7901生长的作用。结论:经过89例胃腺癌及癌旁组织的RT-qPCR验证,lncRNA RP3-333A15.1在胃腺癌组织中呈下调表达,与前期芯片检测结果一致。体外细胞实验和动物实验证实了lncRNA RP3-333A15.1过表达后显著抑制了胃腺癌细胞的增殖、侵袭、转移等生物学行为。LncRNA RP3-333A15.1在胃腺癌及癌旁组织中的差异表达与肿瘤大小和有无脉管侵犯有关。综上所述,lncRNA RP3-333A15.1具备成为全新的胃癌早期诊断的体外检测标志物及胃癌靶向治疗潜在的靶点的临床价值。
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