【摘 要】
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背景:卵巢癌是女性常见的生殖器官恶性肿瘤,由于其组织学类型复杂,缺乏特异性症状和有效的早期诊断方法,多数患者发现时已是晚期。卵巢癌恶性程度高,极易在盆腹腔扩散转移,大部分患者初次治疗后仍会复发,5年生存率远远低于其他肿瘤患者。OIP5是一个重要的肿瘤相关抗原,已有研究发现其在正常组织中呈限制性表达,而在大多数肿瘤组织中呈广泛表达,且与肿瘤细胞的增殖、侵袭等恶性生物学行为息息相关,为影响某些肿瘤患者
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背景:卵巢癌是女性常见的生殖器官恶性肿瘤,由于其组织学类型复杂,缺乏特异性症状和有效的早期诊断方法,多数患者发现时已是晚期。卵巢癌恶性程度高,极易在盆腹腔扩散转移,大部分患者初次治疗后仍会复发,5年生存率远远低于其他肿瘤患者。OIP5是一个重要的肿瘤相关抗原,已有研究发现其在正常组织中呈限制性表达,而在大多数肿瘤组织中呈广泛表达,且与肿瘤细胞的增殖、侵袭等恶性生物学行为息息相关,为影响某些肿瘤患者预后的独立危险因素,因此我们推测OIP5可能参与了卵巢癌的发生、发展过程。目的:本课题旨在研究OIP5基因在卵巢癌中的表达情况,并通过对体外卵巢癌细胞株（OVCAR-3）中OIP5的调控,进一步观察其对卵巢癌细胞增殖、迁移等生物学功能的影响,探讨OIP5在卵巢癌中的作用及其临床意义,以期为卵巢癌的临床诊断与治疗提供新的理论依据。方法:本实验以弋矶山医院妇产科收治的28例卵巢癌患者的手术切除肿瘤组织为研究对象,再以35例正常的卵巢组织作为实验对照组。利用q RT-PCR技术检测OIP5基因在卵巢癌组织及正常卵巢组织中的m RNA表达水平,Western Blot技术检测OIP5基因在卵巢癌组织及正常卵巢组织中的蛋白表达水平,同时采用免疫组化染色法检测OIP5在卵巢癌组织及正常卵巢组织中的表达,并统计分析是否存在差异。体外培养卵巢癌细胞株OVCAR-3,并利用si RNA转染下调细胞株中OIP5基因的表达,通过q RT-PCR技术检测OIP5的下调效率,CCK-8法检测卵巢癌细胞的增殖能力,Transwell法检测卵巢癌细胞的侵袭和迁移能力。结果:1.q RT-PCR、Western blot以及免疫组化检测卵巢癌组织中OIP5基因的表达情况:（1）q RT-PCR检测卵巢癌组织和正常卵巢组织中OIP5基因的m RNA表达水平,结果分别为2.90±0.90,1.39±0.88。两者相比,卵巢癌组中OIP5基因的m RNA表达水平高于正常对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。（2）Western blot检测卵巢癌组织和正常卵巢组织中OIP5基因的蛋白表达水平,结果分别为3.27±0.73,1.71±0.52。两者相比,卵巢癌组中OIP5基因的蛋白表达水平高于正常对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。（3）免疫组化结果显示,OIP5蛋白表达定位于细胞膜和细胞质中,与正常卵巢组织相比,OIP5在卵巢癌组织中的阳性表达显著上调。2.采用q RT-PCR筛选出下调效率最高的干扰OIP5基因表达的序列:与阴性对照组相比,si OIP5-3转染后显示出抑制OIP5的m RNA表达的优势（P<0.05）。3.敲减OIP5基因对卵巢癌细胞OVCAR-3生物学功能的影响:（1）细胞增殖实验（CCK8法）中,相较于对照组,OIP5-si RNA组细胞所测得的OD值降低,提示细胞增殖能力受到抑制,差异有统计学意义（P<0.05）。（2）细胞迁移和侵袭实验（Transwell法）中,相较于对照组,OIP5-si RNA组发生迁移和侵袭的细胞数量减少,提示细胞的迁移能力和侵袭能力均受到抑制,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:OIP5在卵巢癌组织中高表达,提示其可能参与了卵巢癌的发生、发展过程。下调OIP5后卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力降低,提示OIP5可能对卵巢癌的发展和转移具有促进作用。对卵巢癌中OIP5基因的进一步探究为临床上卵巢癌的基因治疗提供了新的思路和靶标。
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