原位分离乳酸发酵新工艺的研究

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本文对耐高糖高酸菌株的筛选、发酵条件的优化以及离子交换吸附发酵耦合的原位分离过程进行了系统研究。 1.从三株出发菌株德氏乳酸杆菌(Lactobacillus delbrueckii)YJS-1、YJS-2、YJS-3中选出可在16g/L乳酸培养基上生长的YJS-2作为出发菌株。通过U.V诱变,得到一株在22g/L乳酸和160g/L葡萄糖培养基上生长的L.delbrueckii YJS-2-1。 2.利用间歇发酵法,研究了L.delbrueckii YJS-2-1的营养要求,结果表明:L.delbrueckii YJS-2-1缺乏合成L-谷氨酸、L-天冬氨酸、L-色氨酸、L-异亮氨酸的能力;生物素、对氨基苯甲酸、硫胺素对L.delbrueckii YJS-2-1生长及产酸有明显的促进作用。同时确定了最佳培养基:大米糖化液150g/L、L-谷氨酸30mg/L、L-天冬氨酸8mg/L、L-色氨酸1.2mg/L、L-异亮氨酸6mg/L、生物素180μg/L、对氨基苯甲酸4mg/L、硫胺素20mg/L。在最适发酵条件下,乳酸产量、对糖转化率、乳酸生产率分别为140.3g/L、93.5%、1.95g·L-1·h-1。因此,最佳配比的生长因子可替代麸皮。 3.研究了树脂的特性,结果表明:D408树脂不易破损、脱色,不吸附葡萄糖、色素等,对L.delbrueckii YJS-2-1无毒性,树脂交换吸附量不受发酵液中的葡萄糖、菌体的影响,适用于原位分离乳酸发酵工艺。 4.研究了D408树脂与间歇发酵的原位分离过程,确定了原位分离乳酸发酵的最优工艺:大米糖化液150g/L、乳酸达10g/L时提取、发酵液上柱量80%、流加糖、补加菌体为6%。在最佳工艺条件下,乳酸收率达到91.8%,发酵周期缩短为64h,乳酸生产率、生物量分别为2.15g·L-1·h-1、30.1g/L,优于现有工艺。
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