【摘 要】
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鸭坦布苏病毒（Duck Tembusu Virus,DTMUV）病对我国水禽养殖业带来了严重的经济损失。预防接种是控制该病的关键,除疫苗自身的免疫原性外免疫方式对免疫效果具有重要影响。本试验就实验室构建成功的以腺病毒为载体、DTMUV E蛋白为抗原、鸭IL-2为佐剂的重组载体疫苗（r ADV-E-IL-2）为研究对象,探讨不同免疫方式鸭体内免疫效果。170只1日龄雏鸭随机分为5组,每组34只,7日
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鸭坦布苏病毒（Duck Tembusu Virus,DTMUV）病对我国水禽养殖业带来了严重的经济损失。预防接种是控制该病的关键,除疫苗自身的免疫原性外免疫方式对免疫效果具有重要影响。本试验就实验室构建成功的以腺病毒为载体、DTMUV E蛋白为抗原、鸭IL-2为佐剂的重组载体疫苗（r ADV-E-IL-2）为研究对象,探讨不同免疫方式鸭体内免疫效果。170只1日龄雏鸭随机分为5组,每组34只,7日龄进行首次免疫,间隔12d进行加强免疫。将r ADV-E-IL-2疫苗以相同的剂量（107PFU）分别通过首次免疫与加强免疫均肌肉注射（i.m.组）、首次免疫肌肉注射加强免疫点眼滴鼻（i.m.+e.n.组）、首次免疫与加强免疫均点眼滴鼻（e.n.组）这三种免疫方式接种鸭群,同时设立的阳性对照组肌肉注射商品化疫苗WF100（PC i.m.组）、阴性对照组肌肉注射PBS（PBS i.m.组）。在首次免疫后3dpi、10dpi、17dpi、24dpi、31dpi、38dpi、48dpi、60dpi分别收集血清、脾脏与十二指肠检测抗体以及细胞因子变化情况。在加强免疫后12d各组随机选择10只鸭以105PFU的DTMUV CQW1毒株进行攻击,攻毒后7d收集心、肝、脾、肾、脑检测攻毒保护试验各项指标。结果显示:接种r ADV-E-IL-2疫苗后i.m.组、i.m.+e.n.组与e.n.组接均可有效刺激机体产生高水平中和抗体以及特异性抗体Ig G,但Ig G无显著差异。在首次免疫后38d,i.m.+e.n.组（1:68）中和抗体水平显著高于i.m.组（1:40）（p<0.05）。十二指肠中黏膜免疫反应产生的分泌型Ig A在首次免疫后17-60dpi,i.m.+e.n.组与e.n.组均显著高于i.m.组（p<0.05）。脾脏中IL-10表达量在首次免疫后17dpi,i.m.+e.n.组（4.61±0.45）与e.n.组（4.90±0.15）显著高于i.m.组（3.49±0.47）（p<0.05）;脾脏中IL-4表达量在首次免疫后24dpi时e.n.组（7.97±0.15）显著高于i.m.+e.n.组（6.93±0.56）（p<0.05）;脾脏中IFN-γ表达量在首次免疫后24dpi、31dpi时i.m.+e.n.组（9.26±0.28）（11.45±0.89）均显著高于i.m.组（8.09±0.34）（9.65±0.46）（p<0.05）,而在首次免疫后60dpi,i.m.+e.n.组（9.02±0.26）显著高于e.n.组（8.19±0.23）（p<0.05）。攻毒保护试验表明,仅PBS阴性对照组出现发病死亡,剖检可见各试验组均出现不同程度脾脏肿大、肝脏出现不同程度出血斑点。试验鸭心脏中DTMUV拷贝数i.m.+e.n.组（5.92±0.19copies/g）显著低于i.m.组（6.32±0.16 copies/g）（p<0.05）;肝脏中DTMUV拷贝数e.n.组（5.68±0.09 copies/g）显著低于i.m.组（6.23±0.28copies/g）（p<0.05）;而脑组织中DTMUV拷贝数i.m.+e.n.组（5.58±0.17 copies/g）则显著低于i.m.组（5.99±0.17 copies/g）与e.n.组（5.97±0.62 copies/g）（p<0.05）。各组试验鸭心、肝、脾、肾、脑组织的HE染色病理切片均出现了不同程度的病变,i.m.组肝脏病变最为严重,视野中出现大小不一的空泡,且肝索紊乱、肝小叶结构不明显;e.n.组心脏呈现水肿;i.m.组、i.m.+e.n.组与e.n.组的肾小管细胞出现颗粒变性、间质散在淋巴细胞,i.m.组脑组织血管周围炎性细胞增多。本研究证实,r ADV-E-IL-2疫苗通过首次免疫肌肉注射加强免疫点眼滴鼻（i.m.+e.n.）接种可有效刺激机体产生良好的免疫应答,有效降低各组织中的病毒含量、产生轻微的病理损伤,更好的保护机体免受DTMUV侵害。
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