本论文以草菇VolvariellavolvaceaV23总RNA为模板，采用RT-PCR法，克隆了包括自身信号肽在内的中性内切葡聚糖酶I基因(egI)的cDNA序列。测序结果表明，cDNA序列全长1167bp，编码389个氨基酸，推测第1-23位氨基酸为信号肽，第24-389位氨基酸为成熟肽，属于糖苷水解酶第五家族。 将EGI成熟肽编码序列克隆进大肠杆菌表达载体pET-28a，构建了重组表达载体pET/egI，转化大肠杆菌BL21(DE3)获得了重组菌株BL21/egI。SDS-PAGE分析表明：EGI在大肠杆菌中实现了胞内表达，分子量约为39.5kD，但不具有酶活力。 将EGI成熟肽编码序列克隆进分泌型表达载体pPIC9K，构建了重组表达载体pPIC9K/egI，用SalI线性化后电转化毕赤酵母GS115，经过G418抗性和产酶能力的筛选，得到了一株高产菌株Ppastoris-EGI1，SDS-PAGE分析表明：EGI在毕赤酵母中实现了分泌表达，分子量约为42kD，大于39.5kD的理论分子量，原因可能是表达产物在翻译后修饰时发生了糖基化。 对毕赤酵母发酵生产EGI的条件进行了优化，结果显示：在诱导时间为96h，甲醇诱导浓度为2.0％，最初诱导pH为7.5，BMGY培养基甘油浓度为4.O％，BMMY培养基补加甘油0.75％和表面活性剂吐温20浓度为0.15％时，产酶效率最高，达到4612U/mL。 对EGI的部分酶学性质进行了研究，结果显示：酶的最适反应温度为55℃；最适反应pH为7.5；当温度在55℃以下时，酶有很好的温度稳定性，当超过55℃时快速下降，但是到65℃时仍然保存60％的酶活力；在pH6.5-9.0的范围内，酶液有较好的pH稳定性，其酶活力保存90％以上。