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目的:通过观察桑皮止咳方对呼吸道合胞病毒感染后咳嗽BALB/c小鼠模型的疗效及对NGF、IL-4和IFN-γ的影响,探讨桑皮止咳方治疗呼吸道合胞病毒感染后咳嗽小鼠模型的疗效和作用机制,为桑皮止咳方的临床应用提供实验依据。材料与方法:将96只BALB/c小鼠随机分为:正常组、模型组、孟鲁司特钠组、桑皮止咳方高、中、低3个剂量组,每组16只。除正常组外,均采用呼吸道合胞病毒滴鼻的方法制备BALB/c小鼠感染后咳嗽模型。造模后各组分别予以相应药物干预,共给药2周。观察BALB/c小鼠的一般状态,实验结束后用辣椒素激发小鼠,测定咳嗽次数;检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞计数;留取肺组织观察病理变化;采用ELISA法检测BALF中IL-4,IFN-γ和NGF的表达;采用免疫组化法检测肺组织中NGF的表达及RT-PCR法检测肺组织中IL-4,IFN-γ及NGF的表达水平。结果:1.模型鉴定:与正常组相比,RSV感染组小鼠咳嗽次数增多,BALF中白细胞计数增多,有统计学意义(P<0.05);在病理改变方面:RSV感染组小鼠肺组织可见气道黏膜增厚,血管及气道周围可见炎性细胞浸润;正常组小鼠未见明显病理变化,RSV感染后的慢性炎症引起了气道敏感性增高,提示造模成功。2.一般状态:正常组小鼠状态良好,正常活动,皮毛柔顺光泽,进食饮水正常;模型组状态最差,精神欠佳,皮毛凌乱,光泽减少,进食量减少;其他各治疗组较模型组均有所改善。3.咳嗽次数:与正常组相比,模型组咳嗽次数显著增多,有统计学意义(P<0.05);药物干预后,各药物干预组与较模型组相比有不同程度减低,除桑皮止咳方低剂量组外均有统计学差异(P<0.05);与孟鲁司特钠组比较,桑皮止咳方高剂量组咳嗽次数改变差异不明显,无统计学意义(P>0.05),桑皮止咳方中剂量组咳嗽次数明显增多,有统计学意义(P<0.05)。4.在肺组织病理改变方面:正常组小鼠肺组织无明显病理变化;模型组气管管腔狭窄,大量炎性细胞浸润,黏膜增厚;各药物干预组病理变化较模型组减轻。5.支气管肺泡灌洗液中炎性细胞计数:在实验各组支气管肺泡灌洗液中中性粒细胞计数差异不明显,无统计学意义(P>0.05);与正常组相比,模型组BALF中白细胞、单核巨噬细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞计数明显增高,有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,桑皮止咳方高、中剂量组、孟鲁司特钠组中白细胞、单核巨噬细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞不同程度降低,有统计学意义(P<0.05),桑皮止咳方低剂量组白细胞计数降低,有统计学意义(P<0.05),桑皮止咳方低剂量组单核巨噬细胞细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞差异不明显,无统计学意义(P>0.05);与孟鲁司特钠组比较,桑皮止咳方组白细胞数均增高,有统计学意义(P<0.05),桑皮止咳方高剂量组单核巨噬细胞、淋巴细胞和嗜酸性粒细胞改变,差异无统计学意义(P>0.05),桑皮止咳方中剂量组单核巨噬细胞和淋巴细胞增多,有统计学意义(P<0.05),桑皮止咳方中剂量组嗜酸性粒细胞细胞改变,差异无计学意义(P>0.05)。6.ELISA检测支气管肺泡灌洗液中IL-4、IFN-γ、NGF的含量:与正常组相比,模型组IL-4、NGF含量增多,IFN-γ含量减少,有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,桑皮止咳方高、中剂量组,孟鲁司特钠组IL-4、NGF的含量降低,IFN-γ的含量增多,有统计学意义(P<0.05);桑皮止咳方低剂量组IL-4、NGF、IFN-γ改变,差异无统计意义(P>0.05)。与孟鲁司特钠组相比,桑皮止咳方高剂量组中IL-4、IFN-γ、NGF的含量改变,差异无统计学意义(P>0.05),桑皮止咳方中剂量组IFN-γ减低、NGF增多,有统计学差异(P<0.05),而IL-4的改变无统计学意义(P>0.05)。7.免疫组化法检测肺组织中NGF的表达:与正常组相比,模型组肺组织中NGF表示增高,有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,各药物干预组NGF平均光密度降低,除桑皮止咳方低剂量组外差异均有统计学意义(P<0.05);与孟鲁司特钠组比较,桑皮止咳方高、中剂量组NGF表达改变不明显,无统计学意义(P>0.05)。8.RT-PCR法检测肺组织IL-4、IFN-γ、NGFm RNA的表达相对定量:与正常组相比,模型组IL-4、NGFm RNA表达显著增多,IFN-γm RNA表达显著减少,有统计学意义(P<0.05);与模型组相比较,各药物干预组IL-4、NGFm RNA表达均降低,IFN-γm RNA表达均增多,除桑皮止咳方低剂量组外差异均有统计学意义(P<0.05);与孟鲁司特钠组比较,桑皮止咳方高剂量组IL-4、IFN-γ、NGFm RNA改变不明显,无统计学意义(P>0.05),桑皮止咳方中剂量组中IFN-γm RNA表达显著减少,有统计学差异(P<0.05),IL-4、NGFm RNA改变不明显,无统计学意义(P>0.05)。结论:1.桑皮止咳方对RSV感染后咳嗽小鼠的一般状态,咳嗽症状,BALF中炎性细胞和肺组织的病理变化均有明显的改善作用。2.桑皮止咳方治疗RSV感染后咳嗽小鼠可能是通能下调NGF的表达,降低了IL-4的表达,增高了IFN-γ的表达,改善RSV感染后咳嗽小鼠的慢性气道炎症。