具有抑制幽门螺旋杆菌黏附性的牛乳蛋白的研究

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幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,Hp)是与慢性B型胃炎、消化性溃疡以及胃癌的发生密切相关的革兰氏阴性菌。幽门螺旋杆菌的黏附过程是其致病的关键,目前认为使用抗粘附物质是治疗幽门螺旋杆菌对组织感染的有效方法。近年来关于牛乳具有抑制幽门螺旋杆菌黏附性已有报道,但是有关牛乳具体有效活性成分方面的研究还是一个空白。本项研究的目的是从牛乳中探索出具有抑制幽门螺旋杆菌黏附性作用的有效活性成分。本项研究以血凝抑制试验结果为指标,利用超滤、凝胶过滤层析、SDS-聚丙烯酰胺电泳、MALDI-TOF-MS及其它生物化学技术,研究牛乳中各种成分对幽门螺旋杆菌粘附性的影响,确定并分离具有抑制幽门螺旋杆菌黏附性作用的有效活性成分,并对活性成分的结构进行初步分析。本项研究主要结果如下:1)用血凝抑制试验,研究牛乳中各种成分对幽门螺旋杆菌粘附性的影响,结果发现高分子量乳清蛋白浓缩物(HWPC)具有抑制螺旋杆菌血凝作用。2)用凝胶过滤层析法按分子量大小依次将HWPC分为F1、F2、F3三个组份,仅F2组份显示血凝抑制作用,且血凝抑制效价为1∶16,最低有效抑制活性浓度为2mg/ml。3)F2组分经MALDI-TOF-MS及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析显示,F2组份的分子量在73 KDa到164 KDa之间,其主要成分是由分子量为14 KDa及18 KDa亚基形成的多聚体蛋白。以上结果表明,以特定形式存在的高分子量乳清蛋白具有抑制幽门螺旋杆菌黏附性作用。
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