内皮脂酶与子痫前期发病机制的相关研究

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目的:研究 EL(Endothelial lipase,内皮脂酶)在 PE(Preeclampsia,子痫前期)胎盘组织中的差异表达情况,并探讨EL对人胎盘滋养层细胞生物学功能的影响及其调控机制。方法:收集16例重度PE患者以及16例正常剖宫产孕妇胎盘组织。采用Real-Time PCR、Western Blot、免疫组化的方法检测 EL 在两组胎盘组织中 mRNA 水平、蛋白水平的表达差异。利用脂质体转染技术将小干扰RNA转染到HTR8/SVneo内,干扰EL表达并检测干扰效率。采用Annexin V-FITC、细胞划痕实验、CCK8、Tube formation等方法检测EL表达降低对HTR8/SVneo凋亡水平、迁移能力、细胞活性以及血管化能力的影响。运用Real-Time PCR技术探究EL表达降低对下游因子表达的影响。结果:1)PE组与正常组相比,EL的mRNA、蛋白表达水平均明显下降;免疫组化结果显示,EL在胎盘中表达较为广泛,但在PE组信号减弱;2)siRNA转染后EL的表达下降、Real-Time PCR结果显示EL转染有效;转染后的HTR8/SVneo细胞凋亡增加、迁移能力下降、细胞活性和血管生成能力均明显下降;3)MMP9的表达伴随EL下降而下降,同时,S1PR-SPHK-eNOS通路受体的表达也有所变化,即S1PR1表达上升、S1PR3表达下降。结论:EL可以通过改变MMP9表达从而影响人滋养层细胞的生物学功能,并可能通过S1PR-SPHK-eNOS通路参与胎盘血管的浅着床过程,从而促进PE的发生发展。
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