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应用生物拮抗菌对果蔬采后病害进行生物防治是目前最有希望替代化学杀菌剂的一种新型保鲜技术。本研究以红提葡萄为试材,从葡萄采后不同时期和不同部位分离、筛选酵母拮抗菌,并对其进行了离体和活体拮抗效果鉴定,从鉴定出的6株拮抗效应较好的菌株中对拮抗效果最优的拮抗酵母菌YT-2进行了生物学鉴定,研究了其生物学特性和拮抗效果,探讨了其可能的拮抗机理,并制备了液体和干粉剂型。1.红提葡萄优势致病菌的分离与鉴定在红提葡萄采后4个时期的果粒表面、伤口、果梗3个部位分离到灰葡萄孢霉、黑曲霉、青霉和交链孢霉优势致病菌4种。2.拮抗菌的分离与筛选从红提葡萄采后4个时期和3个部位分离和筛选到拮抗酵母菌26株。经过离体和活体筛选,从6株拮抗效果较优菌株中优选出最优菌株YT-2,其对灰葡萄孢霉、交链孢霉、黑曲霉和青霉均有显著抑制效果。3.拮抗酵母菌YT-2的鉴定通过菌落形态、培养特征、生理生化特性和26S rDNA测序鉴定,确定YT-2为库德里阿兹威毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)。4.拮抗酵母菌YT-2的生物学特性研究YT-2在麦芽汁培养基和NYDB培养基中的生长曲线趋势基本一致,培养4h后进入对数生长期,12h后进入稳定期;最佳生长碳源是葡萄糖;最佳生长氮源是蛋白胨,其次为酵母膏;最适pH为6～7;最适温度是28℃;对其生长影响最大的无机盐是氯化钙和氯化钠。5.拮抗酵母菌的拮抗机理研究YT-2拮抗效果最佳菌浓度为1.0×108CFU/mL,此浓度细胞悬浮液接种前48h、24h、2h、0h和延后2h、24h、48h接种病原孢子液,均能够不同程度的抑制病原菌的生长,接种越早拮抗效果越明显;YT-2的培养上清液和热杀死液均对葡萄采后致病菌无拮抗效果,说明YT-2的拮抗机制不是分泌拮抗物质;YT-2培养原液较细胞悬浮液的拮抗效果差,说明YT-2的拮抗机制可能是营养和生存空间竞争。6.拮抗酵母菌生防制剂的制备与应用初步研究YT-2液体生防制剂、YT-2干粉生防制剂和拮抗悬浮液在4℃条件下保存细胞存活率明显优于对照组,50%以上的保存时间分别为60d、90d和30d;应用于葡萄保鲜,无伤接种后25℃恒温贮藏6d液体制剂处理组腐烂率18.6%,干粉制剂处理组腐烂率28%,而对照组腐烂率达100%。