人参皂苷Rg1促进人牙周膜干细胞增殖及骨向分化

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目的:体内外分别研究人参皂苷Rgl(Gnsenoside Rgl,GS Rg1)对人牙周膜干细胞增殖及骨向分化的影响,证实GS Rg1作为生长因子应用于组织工程领域具有一定可行性。方法:体外酶消化组织块法培养hPDLSCs,有限稀释克隆法纯化hPDLSCs,细胞表面标志物检测鉴定hPDLSCs。1×10-5mol/L的GS Rg1可促进牙周膜细胞的增殖和骨向分化。因此,hPDLSCs与1×10-5mol/L GS Rgl共同培养,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测其增殖,碱性磷酸酶(ALP)染色后酶联免疫仪检测其骨向分化,实时定量聚合酶链(real time PCR)检测成骨基因表达情况,茜素红染色检测其骨量表达。hPDLSCs和纳米羟基磷灰石(nHAC)及1×10-5mol/L GS Rg1共同矿化诱导培养后,将其植入免疫缺陷鼠,组织切片,HE染色观察骨形成状况。结果:1×10-5mol/L GS Rg1作用于hPDLSCs后,实验组与对照组相比较,第2,3,4,5天hPDLSCs增殖明显;3,5,7天检测ALP表达量均升高;RUNX2, Collagen1,OPN,OCN表达水平明显增高;体内实验,组织切片观察骨量增加明显。结论:一定浓度GS Rgl可以促进hPDLSCs的增殖及骨向分化,其作为生长因子,应用于牙周组织工程具有一定可行性。
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