软骨细胞——胶原海绵复合体与碱性纤维母细胞生长因子联合运用修复软骨缺损的形态学研究

来源 :安徽医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tubage1022
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目的(1)观察用人胎盘Ⅰ型胶原海绵作为兔软骨细胞体外三维培养支架时,软骨细胞形态学特征和功能及该支架的吸附性和组织相容性,从而了解其作为软骨细胞体外三维培养支架材料的可行性。(2)研究在体条件下软骨细胞—胶原海绵复合体与碱性纤维母细胞生长因子联合运用修复软骨缺损的疗效,为临床应用提供理论依据。方法(1)将幼兔原代和传代软骨细胞接种于人胎盘Ⅰ型胶原海绵进行体外培养,用光镜和扫描电镜观察细胞形态和结构及支架的吸附性和组织相容性,用免疫组化观察细胞Ⅱ型胶原合成。(2)软骨细胞取自三日龄异体幼兔,体外培养后接种于胶原海绵支架上,移植于成年兔膝关节软骨缺损处,在同一大白兔双侧膝关节内外髁分四组作自身对照研究,左膝股骨外髁关节软骨作软骨缺损组,左膝股骨内髁关节软骨作软骨细胞—胶原海绵复合体移植组,右膝股骨外髁关节软骨作单纯碱性纤维母细胞生长因子(bFGF)应用组,右膝股骨内髁关节软骨作软骨细胞—胶原海绵复合体与碱性纤维母细胞生长因子联合应用组。移植术后2、4、8、12、16、20周分批处死,进行肉眼、组织学、透射电镜观察。结果 (1)以胶原海绵作为支架的传代软骨细胞能维持其形态学特征及细胞功能;该支架有较好的吸附性和组织相容性。(2)移植术后12周联合应用组修复情况优于单纯复合体移植组,存在统计学差别,20周这二组无差别,组织学分析均为软骨性修复;在不同时间点空白对照组和单纯bFGF应用组无差别,但在组织学上修复的优势组织后者优于前者。结论 人胎盘Ⅰ型胶原海绵可作为软骨细胞体外三维培养较好的支架材料。以胶原海绵作为支架材料的软骨细胞移植可引起软骨性修复;bFGF在软骨组织工程中有较重要的作用。
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