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[目的]1.分析砷暴露职业工人尿中砷化合物含量,评价砷暴露职业工人机体砷负荷;2.检测PANDAR基因表达;砷暴露工人对DNA甲基化的影响,分析PANDAR基因表达与三种尿砷化合物含量之间的关系;3.检测不同浓度砷暴露对细胞NEAT1基因表达及其甲基化的影响;砷代谢产物对NEAT1基因表达的变化;加入甲基供体后NEAT1基因表达的改变。[方法]1.采用整群抽样的方法,抽取某砒霜厂砷暴露职业工人作为暴露组,同时设置对照组,采集其尿液样本和外周血液样本;2.用HG-coldtrap-AAS法测定iAs、MMA、DMA三种砷化合物含量,计算TiAs、iAs%、MMA%、DMA%、PMI、SMI等砷甲基化指标,砷暴露对职业工人PANDAR基因表达的影响;3.用离心柱法提取外周血液基因组DNA,使用甲基化敏感性高分辨溶解曲线方法检测职业工人砷暴露对PANDAR基因甲基化的影响;4.实时荧光定量检测不同浓度砷暴露对细胞NEAT1基因表达及其甲基化的影响,及职业工人外周血中淋巴细胞的PANDAR基因表达;5.采用t检验及非参数检验方法,分析职业工人砷暴露对PANDAR表达、DNA损伤及甲基化的影响,以及尿液中砷及砷化合物含量,采用Spearman相关分析尿砷、砷化物及甲基化程度对PANDAR基因表达的影响。[结果]1.尿中iAs、MMA、DMA和TiAs的含量暴露组工人尿中iAs、MMA、DMA和TiAs浓度的中位数分别为104.69(20.115,645.03)μg/ml、156.43(20.59,892.57)μg/ml、603.66(48.40,2172.25)μg/ml 和 822.39(111.63-3526.1)μg/ml。对照组工人尿中 iAs、MMA、DMA 和 TiAs浓度的中位数分别为 1.67((0.42,5.83)μg/ml、1.57(0.41,5.84)μg/ml,14.85(1.82,43.06)μg/ml和17.98(2.95,54.28)μg/ml,在尿总砷生物接触限值以下。2.人群中外周血PANDAR基因表达暴露组与对照组对比,PANDAR表达在暴露组和对照组之间的差异(t值=2.915,P值<0.05),暴露组的表达显著高于对照组。PANDA基因的表达与iAs、MMA之间存在正相关关系.外周血中PANDAR基因表达与DNA甲基化率呈负相关关系,差异具有统计学意义(R2=0.05,p=0.011.)3.不同砷浓度下,NEAT1基因在A549细胞及MDA-MB-M231细胞中表达对照组对比,暴露组NEAT1表达有差异,P值均<0.05,(其中A549细胞,与对照组对比,不同浓度暴露组的t值依次为4.177,4.229,4.730;MDA-MB-M231细胞中,暴露组与对照组对比,t值依次为4.001,13.62,10.82),可认为随着砷浓度升高,NEAT1基因表达量升高。SAM的联合作用下,NEAT1基因在A549细胞及MDA-MB-M231细胞中表达,砷染毒组和砷联合SAM染毒组,NEAT1表达表达与对照组比较有差异(A549细胞中t值=17.13,P值<0.05;MDA-MB-M231细胞中t值=11.73,P值<0.05),可认为砷染毒组NEAT1基因表达上调。砷染毒组和砷与SAM联合染毒组对比,NEAT1表达存在差异(A549细胞中t值=3.494,P 值<0.05;MDA-MB-M231 细胞中 t 值=3.595,P 值<0.05),可认为加入SAM后,NEAT1基因表达较单砷染毒组NEAT1基因表达有所降低。[结论]1.职业性砷暴露工人体内砷与砷化合物浓度明显升高,砷暴露对工人存在潜在的职业危害。TiAs的水平显著高于美国政府召开工业卫生学家会议最新制定的尿总砷生物接触限值,即35μg/ml。2.本实验发现职业工人砷暴露PANDAR基因的表达升高,且砷暴露水平越高,PANDAR基因的表达越高,且PANDAR基因表达与机体尿液中的iAS、MMA呈正相关关系。3.细胞实验中发现随着砷浓度升高,NEAT1表达升高,砷代谢产物没有导致NEAT1表达升高,推测是砷的代谢过程致使基因表达升高。加入SAM后,对比单砷染毒组NEAT1基因表达有所降低。推断是由于SAM加快砷在细胞内的代谢,抵消砷化物对NEAT1基因表达影响。