手性药物对映体在生物体内的吸收、分布、代谢和排泄存在显著差异,从而使它们之间可以产生不同甚至完全相反的药理和毒理作用。使用单一对映体作为药物一直受到医药企业和研究机构的关注。在手性药物研发中,对映体杂质对手性药物的质量和安全性至关重要,而一对对映体之间理化性质的相似性,使得对映体杂质的分离和检测一直是药物分析的研究热点和难点。质谱作为一种快速、灵敏和超微量的检测手段,可以通过多级质谱和能量分辨曲线对部分位置异构体和差向异构体进行区分。但是质谱用于对映异构体的鉴别和区分依旧是一个难点,特别是含有多个手性中心的药物目前还没有文献报道。本论文首次以含有两个手性中心的药物他达拉非为研究对象,通过金属离子配合作用,在对映异构体上引入手性配体使其转化成非对映异构体,从而使其质谱裂解反应产生差异,实现他达拉非对映体以及非对映异构体杂质的快速区分和定量检测。并以此为基础对一系列手性药物异构体杂质检测进行了研究,具体研究结果如下:1.以L-色氨酸、金属离子和手性药物形成二元配合物区分他达拉非对映体以金属镍离子为中心,配位一分子的L-色氨酸(L-Trp),与他达拉非对映体在质谱上形成二元配合物[NiⅡ(Tadalafil)(L-Trp)-H]+。通过对该配合物进行碰撞诱导解离产生的二级碎片离子实现了对映体的区分和手性杂质含量的定量测定。与手性色谱固定相的测定结果相比较,该方法在快速区分对映体的同时,获得了精确、稳定的定量测定结果。该实验结果在离子阱、三重四级杆和飞行时间质谱上均得到了重复,证明采用该方法区分手性他达拉非对映体在不同原理质谱仪上的通用性。2.一石二鸟法,即以同一种金属配合物体系区分互为配体的手性药物对映或非对映异构体(1)3种质子泵抑制剂药物与他达拉非互为手性配体的分析:以RR-他达拉非作为手性配体,实现了泮托拉唑、兰索拉唑、奥美拉唑的区分和定量测定。反之,以质子泵抑制剂的对映体作为手性配体,同样能够区分他达拉非;通过筛选发现埃索美拉唑为最佳的手性配体,能够实现他达拉非所有异构体的区分和定量测定。(2)手性药物依折麦布和安立生坦异构体的区分:以S-安立生坦为手性配体,实现了区分依折麦布(SRS构型)和它的三个异构体(RSR,SSR和RRS构型);同时以依折麦布(SRS构型)为配体实现了安立生坦对映异构体之间的区分。(3)本研究还发现使用S-安立生坦作为配体能够区分与依折麦布联合用药的手性药物阿托伐他汀,并实现了同时区分和定量两个手性药物存在的混合体系中的对映异构体,为区分其它他汀类手性药物对映体提供了新思路。本章首次开发了一石二鸟法,以同一种金属配合物体系区分不同类型的手性药物对映体,并采用动力学方法(Kinetic Method)和手性识别法(Chiral Recognition Method)两种方法实现了质谱的手性区分,为这些手性药物的异构体杂质检测提供了高效、简便、快速和高选择性的分析方法。3.以普利类手性药物作为配体区分他达拉非及其两种合成中间体他达拉非和它的两种合成中间体具有相同的两个手性中心位点,因此均含有四个异构体。寻找一个配体能同时区分他达拉非和合成中间体的对映异构和非对映异构体是本实验的难点。为了能在飞行时间质谱上实现这一目标,本章以金属离子配合物体系为基础,筛选了 7个手性的普利类药物作为配体。通过对比配合物的二级质谱图,获得最佳的配体为雷米普利。本实验以二价金属离子与手性药物及其配体形成配合物,通过其质谱碎片离子的差异实现了异构体的区分;并且使用同一个手性配体能区分含有两个手性中心的他达拉非及其合成中间体的所有异构体;方法具有高选择性。