PPAR-γ、MMP-9在急性冠脉综合征合并糖尿病患者外周血中的变化及相关性研究

来源 :泰山医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hznewblue
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目的:  本文旨在通过收集临床病例,分析观察急性冠脉综合征(ACS)合并2型糖尿病(T2DM)患者与单纯急性冠脉综合征患者外周血核转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、蛋白质和mRNA的变化,进一步探讨PPAR-γ对ACS合并2型糖尿病患者内皮保护、斑块稳定等方面的影响,为ACS合并糖尿病患者新的药物治疗思路提供理论依据。  方法:  选取诊断为ACS患者82例,其中合并T2DM的42例(ACSDM组),非糖尿病患者40例(ACS组)。均行冠状动脉造影术,至少一支冠脉病变狭窄≥50%。30例无冠心病及糖尿病患者作为对照组。所有入选者在胸痛发作24小时内抽取静脉血,梯度分离法分离淋巴细胞,采用裂解液提取总蛋白,BCA试剂盒测定蛋白浓度,Western blot检测淋巴细胞PPAR-γ、MMP-9、eNOS蛋白质的表达,软件分析测定蛋白条带的灰度值,计算目的蛋白/β-actin的比值;Trizol法提取淋巴细胞RNA,逆转录试剂盒逆转录DNA,RT-PCR测定淋巴细胞PPAR-γ、MMP-9、eNOS mRNA的表达,用Light Cycler自带分析软件进行数据处理,用2-ΔΔCt法分析数据。应用SPSS19.0对各组数据进行统计学分析。  结果:  1、各组基线资料比较:对照组、ACS组、ACSDM组患者在年龄、性别、体重指数、吸烟者比例、高血压病史、他汀药物使用史、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-CH)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-CH)、血肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)等方面的差别在统计学上无意义(P均>0.05)。ACSDM组与ACS组在既往冠心病史、STEMI/NSTEMI病例数方面无统计学差异(P均>0.05)。空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1C)水平,ACSDM组显著高于对照组和ACS组(P<0.05),FPG、HbA1C水平在对照组、ACS组间无统计学差别(P均>0.05)。  2、外周血PPAR-γmRNA表达水平比较:ACS组、ACSDM组PPAR-γmRNA表达水平较对照组显著减少(P均<0.05),ACSDM组 PPAR-γmRNA表达水平低于ACS组(P<0.05)。对照组PPAR-γmRNA表达相对值1.62±0.22,ACS组0.95±0.13, ACSDM组0.51±0.11。  3、外周血eNOSmRNA表达水平比较:ACS组eNOS mRNA表达水平低于对照组(P<0.05),ACSDM组eNOS mRNA表达水平显著低于对照组(P<0.05),ACSDM组eNOSmRNA表达水平低于ACS组(P<0.05)。对照组外周血淋巴细胞eNOSmRNA表达相对值1.32±0.13,ACS组0.66±0.11,ACSDM组0.39±0.08。  4、外周血MMP-9mRNA表达水平比较:ACS组、ACSDM组MMP-9mRNA表达水平较对照组显著升高(P均<0.05),ACSDM组 MMP-9mRNA表达水平高于ACS组(P<0.05)。对照组MMP-9mRNA表达相对值0.33±0.12,ACS组1.54±0.12,ACSDM组2.10±0.20。  5、外周血PPAR-γ蛋白表达水平比较:ACS组、ACSDM组PPAR-γ蛋白质表达水平较对照组明显下降(P均<0.05),ACSDM组PPAR-γ蛋白质表达水平较ACS组降低更显著(P<0.05)。对照组外周血PPAR-γ灰度值1.45±0.19,ACS组0.82±0.09,ACSDM组0.56±0.08。  6、外周血eNOS蛋白表达水平比较:ACS组、ACSDM组eNOS蛋白质表达水平较对照组明显下降(P均<0.05),ACSDM组eNOS蛋白质表达水平较ACS组降低更显著(P<0.05)。对照组外周血eNOS灰度值0.70±0.13,ACS组0.33±0.06,ACSDM组0.08±0.04。  7、外周血MMP-9蛋白表达水平比较:ACS组、ACSDM组MMP-9蛋白质表达水平较对照组明显升高(P均<0.05),ACSDM组MMP-9蛋白质表达水平较ACS组升高更显著(P<0.05)。对照组外周血MMP-9灰度值0.18±0.06,ACS组0.38±0.09,ACSDM组0.97±0.15。  8、ACSDM组Gensini积分显著高于ACS组(42.49±5.02 VS 27.93±7.11,P<0.01)。  9、相关性分析:Gensini积分与外周血PPAR-γ(r=-0.803,P<0.01)、外周血eNOS水平(r=-0.873,P<0.01)均呈负相关趋势,Gensini积分与外周血MMP-9(r=0.965,P<0.01)呈正相关趋势。外周血PPAR-γ表达水平与eNOS表达水平呈正相关趋势(r=0.95,P<0.01),与MMP-9表达水平呈负相关趋势(r=-0.816,P<0.01),eNOS表达水平与MMP-9表达水平呈负相关趋势(r=-0.865,P<0.01)。  结论:  1、ACS患者外周血PPAR-γ、eNOS蛋白质和mRNA表达水平明显降低,ACS合并糖尿病患者二者下降水平更显著。提示PPAR-γ的内皮保护作用可能与eNOS有关。  2、ACS患者外周血MMP-9蛋白质和mRNA表达水平明显升高,ACS合并糖尿病的患者二者升高水平更显著。提示MMP-9可能参与了糖尿病患者 ACS的发生发展。  3、PPAR-γ与MMP-9之间呈负相关趋势,PPAR-γ与eNOS之间呈正相关趋势,PPAR-γ、eNOS水平随冠状动脉狭窄程度的加重而降低,MMP-9水平随冠状动脉狭窄程度的加重而升高。PPAR-γ在内皮保护、稳定斑块方面可能具有重要作用,其机制可能是通过增加eNOS的表达实现的。
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