【摘 要】
：
柑橘黄龙病（Citrus Huanglongbing,HLB）是世界上危害最严重的柑橘病害,严重影响了世界柑橘产业的发展。由于黄龙病的病原菌难以分离培养,目前还没有有效的防治方法。利用生防菌剂进行防治是一种绿色环保的方式。此外,鸟嘌呤核苷酸合成酶（guanosine 5’-monophosphate synthesis,GMPS）是嘌呤核苷酸合成中的关键酶,抑制其活性可以抑制病原菌的生长和繁殖。本
【基金项目】
：
国家重点研发计划:柑桔和香蕉无病毒种苗繁育技术研发（2019YFD1001802）; 国家重点研发计划:柑桔黄龙病综合防控技术集成研究与示范（2018YFD0201505）; 国家自然科学基金（No.31872064）
论文部分内容阅读
柑橘黄龙病（Citrus Huanglongbing,HLB）是世界上危害最严重的柑橘病害,严重影响了世界柑橘产业的发展。由于黄龙病的病原菌难以分离培养,目前还没有有效的防治方法。利用生防菌剂进行防治是一种绿色环保的方式。此外,鸟嘌呤核苷酸合成酶（guanosine 5’-monophosphate synthesis,GMPS）是嘌呤核苷酸合成中的关键酶,抑制其活性可以抑制病原菌的生长和繁殖。本实验一方面用枯草芽孢杆菌生物菌剂处理柑橘黄龙病感病苗木,探究其对柑橘黄龙病的抑制效果和对苗木生理指标的影响。另一方面克隆了黄龙病亚洲型病原GMPS（Clas GMPS）的C端功能结构域ATP焦磷酸酶（ATP pyrophosphatase,ATPPase）,进行了异源表达、蛋白纯化以及结晶筛选,为以结构信息为基础的抑制剂筛选奠定基础。研究结果如下:1.枯草芽孢杆菌生物菌剂对柑橘黄龙病感病苗木的影响。本实验用枯草芽孢杆菌生物菌剂处理柑橘黄龙病感病苗木,对照组用清水处理。比较处理组和对照组处理前后的阳性率,发现菌剂处理后苗木阳性率为60%,低于对照组的66.7%。测定处理组和对照组苗木的叶绿素含量、净光合速率、多酚含量、矿质元素含量和叶脉胼胝质含量,发现与对照组相比,处理组的叶绿素含量升高了1.1倍,多酚含量升高了30.93%,胼胝质含量降低了13.8%,大部分矿质元素含量显著升高;菌剂处理后短时间内苗木抗性相关酶活超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）等均有提高;并且抗性相关的6个基因GST1、GAPC2、NHO1、WRKY22、WRKY24、HSP90表达量均有上调,其中以HSP90表达量变化最大,菌剂处理12 h后HSP90表达量变化为对照组的12.7倍。以上结果表明菌剂处理能促进植物生长并诱导其产生抗性。2.Clas GMPS蛋白C端结构域的表达纯化和结晶筛选。根据Gen Bank中Clas GMPS蛋白基因序列,克隆了Clas GMPS蛋白C端从203到520 aa的部分,命名为GMPS318;成功构建了表达载体p ET28atplus-GMPS318,在E.coli中异源表达,通过镍柱纯化和分子排阻层析得到均一稳定的目的蛋白。进行蛋白结晶条件的筛选,在0.2 M柠檬酸锂,20%PEG3350和0.2 M柠檬酸钠,20%PEG3350这两个条件下有晶体出现。最后进行盐浓度和沉淀剂浓度的梯度优化,蛋白晶体未发生改变。
其他文献
目的探讨血清可溶性信号素4D（sSema4D）、生长分化因子-15（GDF-15）、趋化素与原发性高血压（EH）患者左心室重构的相关性。方法 2016年1月至2018年1月期间,选取心内科就诊的236例EH患者作为研究对象,根据左心室质量指数（LVMI）将患者分为高血压伴左心室肥厚组（EH+LVH组,n=98）和高血压不伴左心室肥厚组（EH+NLVH组,n=138）。选取同期体检的健康人群100人
细菌的蛋白分泌系统参与细菌多种重要的生理功能,而且与病原菌致病性息息相关。双精氨酸蛋白转运（Twin-arginine translocation,Tat）系统是一种存在于细菌中的特殊蛋白转运分泌系统,能够将完全折叠的蛋白质插入细胞膜或转运至周质中。Tat系统对细菌的能量代谢、细胞分裂以及致病性至关重要,被认为是一种潜在的新型抗生素药物靶标。猪源肠外致病性大肠杆菌（ExPEC）是近年来在猪群中出现
随着汉代大一统局面的崩塌,儒学的衰退,魏晋时期产生了玄学这一哲学思潮。玄学是这一时期的主流思潮,士人普遍受到了玄学的影响,玄学对这一时期社会的各方面也相应产生了极大的影响。在玄学的发展过程中,士人既是玄学理论的创造者,也是玄学理论的接受者,更是玄学理论的践行者。从正始时期开始,以王弼为首建立了以“贵无”为主题的玄学理论,至东晋末年郭象的“独化论”,整个魏晋时期,士人们都浸润玄风之下,这使得士人的思
@任延明（青海大学党委常委、副校长）:《新时代的中国青年》白皮书是新中国历史上第一部专门关于青年的白皮书，客观呈现了十年来中国青年发展事业取得的巨大成就，勾勒了新时代中国青年的主流群像。时代造就青年，盛世成就青年。新时代中国青年生逢中华民族发展的最好时期，拥有更高质量的发展条件、更多人生出彩的机会、更全面的保障支持、更广阔的成长空间，正迎来建功立业的难得人生际遇。正如习近平总书记所言，当代青年是“
捻转血矛线虫病呈全球性分布,在国内外广泛流行,是当前反刍动物最为易感的消化道寄生虫病之一。目前我国对于该病的防控主要依赖于驱虫药物的使用,而长期不合理的使用驱虫药物导致了捻转血矛线虫单耐药株甚至多重耐药虫株的出现,极大增加了防控难度。该病的肆虐严重制约畜牧业的健康发展,因此寻求新的药物靶标或合适的疫苗候选分子对于捻转血矛线虫病的防控迫在眉睫。CAP蛋白家族（Cysteine-rich secret
鱼类摄食和水产养殖业以及其经济效益有重要联系,而鳜鱼（Siniperca chuatsi）作为经济鱼类,食性特殊,天生吃活的饵料鱼,通常不吃死饵料鱼或者人工饲料。而组蛋白修饰作为一种表观调控方式,可以调控基因的转录活性,本研究通过鳜鱼饲料驯化和高糖饲料驯化,探究组蛋白甲基化修饰在鳜鱼饲料驯化和高糖饲料摄食中的调控作用,为研究鳜鱼驯化和肉食性鱼类高糖饲料摄食后摄食量减少的问题提供了理论依据,对实现鳜
目的 探讨芦荟素预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤（IRI）的作用机制。方法 60只大鼠随机分为假手术组、模型组及芦荟素低、中、高剂量组（25、50、100 mg/kg）,7 d后采用无创动脉夹夹闭双侧肾蒂法制备肾缺血再灌注损伤模型。尿素酶-谷氨酸脱氢酶法检测BUN水平，肌氨酸氧化酶法检测Scr水平，ELISA法检测TNF-α、IL-1β、IL-6水平，HE染色法检测肾脏病理损伤及评分，TUNEL染色法
结构化课堂实际上就是指结构化教学,主要是教师在一定的学习环境中,对学生进行有组织、有系统的展开课程教学。并通过一定的完整的结构设计,引发学生对所设计的教学内容进行思考和内化,从而形成对知识结构内在联系的理解与感悟。本文将立足小学数学教学现状的基础上,对让学引思背景下小学数学结构化课堂教学模式展开研究。
断奶期仔猪肠道炎症、腹泻会降低仔猪的生长性能、甚至死亡,对养猪生产造成巨大的经济损失。小檗碱（BBR）是一种人医临床非处方抗炎、抗腹泻药物,因为其良好的效果和安全性,同时价格低廉,因此具有用于治疗仔猪肠炎的潜在价值。本课题组前期研究表明小檗碱对断奶仔猪腹泻具有较好的治疗作用,但其作用机制有待进一步研究,本试验利用转录组学结合体外细胞模型,体内动物模型,研究小檗碱治疗肠道炎症的效果和机制,为小檗碱在
船舶热力系统作为复杂的多领域物理系统，传统的建模方法难以满足其热力设备数字化智能化的发展需求，而结合数字孪生技术可以克服传统建模方法的弊端。为实现多领域建模与数字孪生技术在船舶热力系统中进一步的应用，论文介绍了目前国内外融合多领域建模与数字孪生技术在船舶热力系统上的研究现状，并在多领域建模的基础上提出融合数字孪生与虚实映射技术的仿真研究方法。借助数字孪生和虚实映射技术，论文给出了该方法的主要内容与