一些冬虫夏草定殖真菌分类及其次级代谢产物的初步研究

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冬虫夏草是生长于青藏高原的一味名贵中药材。天然冬虫夏草及其微环境中除生长有冬虫夏草菌外还存在着许多其他真菌。在长期的进化过程中,这些真菌与冬虫夏草形成紧密的关系,部分真菌已发现与冬虫夏草具有相同或相似的化学结构和药理作用,并被开发成菌丝体产品。因此,我们推测天然的冬虫夏草可能存在着一个复杂的微生物区系,这些微生物区系中的真菌可能与冬虫夏草菌协调作用才能形成冬虫夏草;冬虫夏草群落中还有许多重要的真菌资源去认识和开发利用。此前本课题组从青藏高原10个不同地域采集冬虫夏草样品,通过培养和非培养两种方法分析不同地域天然冬虫夏草以及冬虫夏草不同部位(子座、菌核和菌膜)真菌群落结构的差异,为研究冬虫夏草区系中的其他真菌与冬虫夏草菌的相互关系及其在冬虫夏草形成过程中的作用奠定了基础。本研究对前期研究过程中发现的部分疑似真菌新种进行详细分类学研究,并研究部分真菌的抗菌和抗氧化活性。详细结果如下:对获得的28个真菌菌株依据形态特征以及ITS序列进行种类鉴定,对BLAST分析ITS序列相似性较低的8株真菌菌株,进行详细的形态学研究和分子鉴定;研究发现部分菌株不产孢,对其诱导产孢,结果成功诱导了3株真菌产孢;其中2株菌株经详细的形态学观察与多基因树的构建,鉴定为新种;筛选出各地域优势的真菌菌株,进行小量固体发酵后制备成次生代谢产物粗提物;对13株区系真菌和2株虫生真菌进行抑菌活性的分析,研究发现3株冬虫夏草定殖真菌SC13-35F-1、SC13-29F-1、QH13-1F-1和1株虫生真菌19A对Fusarium nivale具有抑菌的活性;采用DPPH法进行抗氧化活性的研究发现,菌株SC13-35F-1、YN13-6F-1、SC13-52F-1、6667、6659、6670和18A具有抗氧化活性;其中SC13-35F-1、YN13-6F-1和18A具有较强的抗氧化能力,自由基清除率达到90%以上:菌株SC13-35F-1同时具有抑菌和抗氧化能力,认为是一株活性较好的菌株;结合抑菌和抗氧化活性的分析结果筛选出具有潜在开发价值的真菌菌种资源。
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