论文部分内容阅读
研究目的:在骨发育和骨折愈合中血管新生和骨形成是相耦合的。尽管人们已早有了解,但具体关系还没有深入的探究。本研究通过检测CD31、Ⅱ型胶原、Fas在软骨内骨化过程中的表达变化,探讨血管侵入和软骨骨化的关系,以及软骨细胞的退变去向的生物学机制。研究方法:取1到19天内奇数天小鼠双侧股骨,断颈法处死,常规包埋,固定,切片。采用HE染色法观察软骨的形态学变化和血管侵入情况;采用免疫组织化学方法观察CD31、Ⅱ型胶原蛋白、Fas的表达情况;采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测CD31m RNA、Ⅱ型胶原m RNA的表达情况。研究结果:HE染色发现,前5天内血管侵入较少,7到13天血管侵入大量增加,15到19天内,鼠股骨内的软骨基质开始钙化,血管减少。免疫组化染色结果发现:CD31主要在肥大软骨细胞和成骨区内表达;Ⅱ型胶原蛋白主要在软骨增生期和肥大软骨细胞内表达;Fas主要在肥大软骨细胞和成骨区内表达。RT-PCR结果发现:CD31m RNA、Ⅱ型胶原m RNA在1到19天的仔鼠股骨中均有表达。随着骨发育的加快,血管侵入增多,CD31m RNA的表达均随日龄的增加而增加,骨发育进程减缓,CD31m RNA的表达下降。CD31m RNA的表达的峰值出现在第13天。Ⅱ型胶原m RNA的表达的峰值出现在第17天。研究结论： 1)骨骺板生长区和次级骨化中心具有不同的成骨方式,骨次级骨化中心软骨细胞无增生期分化。股骨内骨化过程中,血管侵入与骨发育相互协调,共同促进软骨内骨化;2)在骺软骨板的关节方向,存在一个骨化面,形成并列骨板;3)肥大软骨细胞不是终末细胞,具有内皮表型,并可能转分化为血管内皮细胞,参与血管的构建,促进血管的入侵。