【摘 要】
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本研究以血清1型鸭疫里默氏杆菌(RA)CH-1株为材料提取基因组DNA,采用限制性内切酶Sau3AⅠ进行部分酶切消化,纯化回收1.0Kb-6.5Kb片段,将其用T4DNA连接酶与经BamHⅠ酶切并去磷酸化的ZAPExpress载体进行连接,用噬菌体包装蛋白包装.经测定包装滴度为5.23×106pfu/ml,蓝白斑筛选重组率为96.8﹪,表明已成功构建血清1型RACH-1株表达型DNA文库,为相关功
【机 构】
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四川农业大学动物科技学院禽病防治研究中心,四川,雅安,625014 四川农业大学动物科技学院禽病防
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会
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本研究以血清1型鸭疫里默氏杆菌(RA)CH-1株为材料提取基因组DNA,采用限制性内切酶Sau3AⅠ进行部分酶切消化,纯化回收1.0Kb-6.5Kb片段,将其用T4DNA连接酶与经BamHⅠ酶切并去磷酸化的ZAPExpress载体进行连接,用噬菌体包装蛋白包装.经测定包装滴度为5.23×106pfu/ml,蓝白斑筛选重组率为96.8﹪,表明已成功构建血清1型RACH-1株表达型DNA文库,为相关功能基因的筛选提供了有用的素材.
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从新疆湖羊肺脏病料中分离出1株支原体XJ-3f,用其培养物人工感染80日龄健康绵羊,28天后剖杀,剖检可见肺表面肉粉色实变,显微病理变化为大灶性融合性肺炎.参考国际已知支原体16SrRNA序列,设计一对扩增700bp片段的通用引物,直接提取肺脏组织DNA进行PCR扩增并克隆、测序.将该序列与Genebank中33种支原体序列比较,结果证明该序列与绵羊肺炎支原体(M.ovipneumonia)标准株
目的：建立检测口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)抗体的单抗阻断ELISA方法,为进一步研究检测试剂盒提供基础.方法：用亲和层析法纯化抗FMDNSP单克隆抗体,并标以辣根过氧化物酶,再以FMDNSP抗原包被微量反应板,经方阵试验优化单抗阻断ELISA的反应体系.用该方法检测FMD阴性群、感染群体和灭活疫苗免疫群体的血清样本,确定了试验体系的临界值.结果：纯化后单抗有良好的反应活性,标记后酶标
为了评价表达鸡马立克氏病病毒gB基因重组鸡痘病毒(rFPV-gB/R)的遗传稳定性,我们将纯化后的重组病毒在CEF单层上连续传30代,引起细胞病变的速度和形态均未发生明显变化;覆盖含X-Gal的琼脂引起的空斑均为蓝色;间接免疫荧光实验证明rFPV-gB/R中的gB基因始终能稳定表达;序列测定结果表明,重组病毒在细胞上连续传30代、在SPF鸡上连续传5代后,gB基因序列没有发生任何变化;以0、10、
根据GeneBank中鸡IFN-α基因设计引物对,利用PCR技术克隆并测定了莱航鸡(SPF)的IFN-α基因,定名为ChIFN-Sl,与GeneBank中IFN-α比较,ORF长度均为582个核苷酸,其成熟肽包含162个氨基酸,相互间同源性在98.8﹪～99.8﹪.将其成熟肽基因序列克隆入pQE30表达载体后,通过ITPG诱导,收集菌体超声波破碎后提取包涵体并进行初步纯化,利用胱氨酸-半胱氨酸再氧
从新疆采取了8个地方绵羊品种的血液样品171份,提取绵羊基因组DNA,用PCR方法扩增绵羊PrP基因,通过序列测定,对它们的PrP基囚型进行研究,确定了PrP基因136、154、171位编码子的多态性为136(A/A),154(H/R)和171(Q/R/H/K),结果发现所检测的新疆地方绵羊品种PrP基因136位密码子均为A,其基因型均为A型痒病抵抗性基因型。
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