斜带石斑鱼NADPH氧化酶、髓过氧化物酶基因的克隆鉴定及刺激隐核虫感染后的转录表达分析

来源 :中国水产学会鱼病专业委员会2015年学术讨论会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shenkui1945
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  本实验克隆了斜带石斑鱼NADPH 氧化酶复合体的5 个亚基(gp91phox、p22phox、p40phox、p47phox、p67phox)和MPO 基因的cDNA 全长并通过实时荧光定量PCR 研究了其在斜带石斑鱼的组织分布及刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans)感染石斑鱼后不同时间点在感染部位(皮肤和鳃)及免疫器官(头肾和脾脏)的差异表达情况。
其他文献
淋巴细胞酪氨酸激酶(LCK)是酪氨酸激酶Src 家族成员之一,主要用于调控淋巴细胞的增殖。本实验从红笛鲷体内克隆出LCK 基因(LsLCK)。
Ⅰ型干扰素在脊椎动物抗病毒免疫中发挥重要作用,其产生主要依赖于先天免疫系统中的模式识别受体如TLR 和RLR 等对病毒的识别.TBK1 作为TLR 和RLR 介导的I 型干扰素表达中的关键激酶受到机体的严密调控.
干扰素(interferon,IFN)主要包括Type Ⅰ、TypeⅡ 和Type Ⅲ,三种类型.IFN-γ 属于Type Ⅱ IFNs,是固有免疫和适应性免疫中的关键细胞因子,在抗病毒,抗胞内细菌感染,抗肿瘤方面发挥重要作用.
干扰素是一类具有多种生物学功能的细胞因子。哺乳动物中,通过分析干扰素家族成员在氨基酸序列、基因座排列、受体系统和信号通路等方面的差异,可以将干扰素主要分为三种类型:Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型。
IL22 是IL10 家族成员之一,主要来源于激活的Th22、Th1、Th17细胞及NK 细胞,作用于非造血性质的表皮细胞和基质细胞.IL22 通过结合受体IL22RA1 和IL10R2,激活下游JAK-STAT 通路,主要依靠STAT3 传递信号,发挥抗细菌作用,诱导促炎因子产生,保护并促进组织再生.
干扰素是一类重要的抗病毒因子,包括Ⅰ 型、Ⅱ 型和Ⅲ 型.目前发现的硬骨鱼类II 型干扰素有IFN-γ 和IFN-γrel.哺乳类中只有IFN-γ,它的受体是IFNGR1 和IFNGR2 形成的四聚体.而对于鱼类IFNG 和IFNGrel 的受体研究的还不是很清楚.有报道显示斑马鱼的CRFB17,CRFB13,CRFB6 可能和IFNG相关,而IFNGrel 主要与CRFB17 相关.
白细胞介素-8(CXCL8),又称IL-8,是一种在炎症反应调节中起重要作用的CXC 型趋化因子.目前在硬骨鱼中已报道的CXCL8 有三种类型,分别是CXCL8_L1、CXCL8_L2 和CXCL8_L3.
Toll 样受体(TLRs)是一类保守的跨膜蛋白受体家族,能够识别多种病原相关分子模式(PAMPs),如细菌和真菌的细胞壁成分、细菌脂蛋白、细菌和病毒的核酸等。
半胱氨酸蛋白酶cathepsin S(CatS)和cathepsin L(CatL)已被证实是哺乳动物MHCⅡ型复合物相关恒定链(Ii 链)加工中的关键酶。然而鱼类半胱氨酸蛋白酶在恒定链加工中的作用却知之甚少。
近年来,随着高通量测序的技术逐步发展与成熟,基于高通量测序,研究养殖物种应对病原微生物入侵的转录组应答有助于更好地理解养殖物种的免疫机制。因此,本研究对人工养殖的草鱼进行草鱼呼肠孤病毒(GCRV)感染之后,将草鱼分为易感型和抗性型;再分别提取两种表型草鱼的头肾和脾脏组织RNA 后构建四个mRNA 文库;之后利用Illumina Miseq 平台进行测序。