丙硫咪唑对家蚕微孢子虫β-tubulin基因表达抑制作用的研究

来源 :中国蚕学会商品性小蚕饲养规程和蚕病防控学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:caiyt
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
丙硫咪唑能够特异性结合在微孢子虫的β 微管蛋白基因上,抑制β 微管蛋白与α 微管蛋白组装微管或使已组 装的微管解聚,使纺锥体不能形成,从而抑制细胞的有丝分裂。为了从分子生物学角度验证丙硫咪唑对家蚕微孢子 虫治疗作用的效果,阐明其药理机制,本文选用家蚕品种P50 为实验对象,采取2 种不同处理方式(1、接种家蚕微 孢子虫(Nosema bombycis) 2、接种N. bombycis后再添食丙硫咪唑),在6个不同时段(丙硫咪唑处理后6h、18h、30h、 42h、66h、90h)分别取中肠组织,以家蚕β-actin基因为内参基因进行不同样品之间mRNA量校正,分析家蚕微孢子 虫β-tubulin 基因相对表达量差异。提取中肠组织总RNA 后,检测其质量和浓度,然后去基因组DNA,再反转录成 cDNA,再用PCR检测模板质量,最后用实时荧光定量PCR检测和分析结果,建立SYBR Green实时荧光定量PCR 基因相对定量表达技术平台。结果表明:PCR 内参基因和目的基因只有特异性目的条带,溶解曲线呈单峰,无基因 组DNA污染,扩增效率在80%-120%之间,用2-△△Ct法计算得到在中肠中随着时间增长,添食丙硫咪唑的家蚕β-tubulin 基因表达量相对于只添食家蚕微孢子虫的值越来越小,在90h达到最低为0.004,抑制作用越来越明显。
其他文献
本研究所利用的低直链淀粉突变体XLA-1、XLA-2是2004年在籼小占(籼粘稻)空间诱变二代中选择出的2个低直链淀粉突变体。根据粳型水稻Wx全序列设计引物扩增突变体XLA-1、XLA-2
家蚕第二白卵(w2)是由突变而来,其基因处于第10染色体上,利用家蚕雌不交换的特点,以家蚕正常品种 P50和第二白卵突变品种菁松白为亲本获得F1(菁松白×P50),再以F1自交获得F2,选取F2代
家蚕二化性品种蚕卵高温光照催青产滞育卵,低温黑暗催青产非滞育卵。有研究表明,不 同催青条件下蚕卵的丙酮酸脱氢酶激酶(PDK)在蛋白质水平上有表达差异。本实验采用蛾区半分 法
空间辐射环境总体上说是复杂和多变的,空间辐射主要是质子和α粒子。本文对碳离子辐射植物诱变效应的射程分布进行了研究。
为了探讨家蚕幼虫马氏管的蛋白质组学及其免疫功能,本文借助蛋白双向电泳技术(2 -D)对感染BmNPV不同时相的家蚕幼虫马氏管蛋白进行分离,随后利用基质辅助激光解析电 离飞行时间质
采用以没食子酸为标准,研究了Folin-ciocalteu 比色法测定桑叶中多酚含量的适宜条件。结 果表明,桑叶提取液在Folin-Ciocalteu试剂2.0ml、20% Na2CO3溶液5.0ml、反应温度30℃、
家蚕裸蛹突变系统的遗传材料有Nd、Nd(2)、Nd-s 和Nd-sD等。其中,Nd 和Nd(2)位于第25 连锁群上,Nd-s 和Nd-sD实际上是一种丝胶茧,位于第14 连锁群上。除Nd-sD外,对其他裸蛹性状突
作为我县四大支柱产业之一的蚕桑业,在适应现代市场经济发展的过程中,面对机遇和挑战,怎样走好规模化的路子,是我们必须时时面对的课题。
为了探讨RNAi 抑制家蚕核型多角体病毒(BmNPV)增殖的效果,用带有lef-1 dsRNA表达盒的转基因 载体pigA3-LEF-Neo转染家蚕BmN培养细胞,通过G418(750-800μg/mL)筛选,获得了稳定转化
谷胱甘肽S-转移酶(GST)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)是生物重要的解毒酶。为了研究重金属铅对鳞 翅目昆虫的影响机制,对家蚕添食Pb(NO3)2进行Pb2+暴露,用酶活测定和real-time PCR