葡萄糖脱氢酶传感器的研究

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与常见的氧化酶不同,脱氢酶传感器工作过程不需要O2/H2O2参与,避免了检测过程中O2/H2O2的干扰。但大部分脱氢酶催化作用的发挥需要烟酰型辅酶NAD+/NADH的参与,它在酶促反应中与酶结合,并作为氧化剂或还原剂直接参与反应。辅酶分子量小,固定化辅酶与电极表面辅酶的原位再生都是限制脱氢酶传感器制备的关键因素。本研究将辅酶与水溶性高分子载体—壳聚糖结合,使其高分子化并生成辅酶衍生物解决辅酶固定化问题,并通过电化学手段实现电极表面NAD+的原位再生。在玻碳电极表面修饰羧基碳纳米管,以检测脱氢酶反应产生的NADH。该脱氢酶电极修饰手段适用于葡萄糖脱氢酶的制备,可用于发酵过程中葡萄糖的快速检测。该电极响应电流与葡萄糖底物浓度在0.01%-1%呈线性关系(图1),该电极操作简便的优点,并且稳定性良好(7d),可应用于葡萄糖快速检测过程。为构建多种脱氢酶固定化酶生物传感器,实现快速、便捷、准确的传感器检测模式奠定基础。
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