PRRSV非结构蛋白Nsp4与sIGLL5相互作用抑制Ⅰ型干扰素产生及分子机制

来源 :第三届东北三省暨内蒙古自治区免疫学学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lshwy
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  猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)为单股正链RNA病毒,基因组至少编码8种结构蛋白和13种非结构蛋白(non-structural protein,Nsp),其中非结构蛋白Nsp4是病毒编码的一种3C样丝氨酸蛋白酶,将基因组上最大的开放阅读框(open reading fram,ORF) ORF1编码的多聚蛋白切割成多个非结构蛋白单体(Nsp3-12),多个Nsp组成复制转录复合体(replication and transcription complex,RTC)参与病毒的复制与增殖。已有报道Nsp4与病毒的毒力以及宿主对病毒的先天性免疫(天然免疫)有关。天然免疫分子RIG-Ⅰ和MDA5可以识别病毒复制过程中产生的dsRNA,招募接头分子,诱导Ⅰ型干扰素产生来抑制病毒复制,而PRRSV可以通过Nsp4抑制dsRNA诱导的天然免疫反应。为寻找PRRSV的重要靶细胞—猪肺泡巨噬细胞(PAM)内与Nsp4相互作用的宿主蛋白,本研究利用酵母双杂交的方法,筛选PAM cDNA文库中与Nsp4相互作用的宿主蛋白,实验发现猪免疫球蛋白lambda轻链相似肽5(swine immunoglobulin lambda-like peptide 5,sIGLL5)与Nsp4存在相互作用,并通过免疫共沉淀试验(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)、GST-pull down试验进一步验证了它们之间的相互作用,借助激光共聚焦试验技术证明Nsp4和sIGLL5在293细胞内共表达时存在共定位。
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