薏米结合多酚分离鉴定及其抗氧化作用机制研究

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本文采用LH-20凝胶柱和半制备液相分离纯化薏米结合多酚粗提物,采用HPLC-DAD-ESI-MS技术分析多酚化合物结构。以福林-酚法测定各组分总酚含量(TPC),以氧自由基吸收能力(ORAC)、清除过氧化氢自由基能力法(PSC)和细胞抗氧化试验(CAA)三种方法测定薏米多酚各级分的抗氧化活性。通过western blot试验研究多酚化合物对HepG2细胞系的H2O2损伤模型的保护机制。结果表明,经LH-20凝胶柱可初步分离出3个组分,比较多酚含量及抗氧化活性,组分二采用半制备液相进一步分离纯化得阿魏酸和对香豆酸,其中阿魏酸的含量为对香豆酸的3倍。与对照组相比,阿魏酸干预组氧化损伤HepG2细胞内的Nrf2、HO-1、GCLC、NQO1蛋白表达量明显增加。结果表明LH-20凝胶柱的分离纯化效果显著,阿魏酸作为薏米结合多酚的主要活性组分,具有一定的减轻细胞氧化损伤作用,其作用机制主要是通过激活Nrf2-ARE信号通路进而增强抗氧化蛋白HO-1、GCLC、NQO1的表达而实现的。
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