【摘 要】
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为了充分发挥宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001所产的木聚糖酶(AusXyn11A)比酶活高的优势,同时提高其热稳定性,使其适应饲料工业中的高温环境,本研究通过理性设计的方法确定用一种细菌来源的极端耐热木聚糖酶基因Evxyn11TS的N端序列替换AusXyn11A中的对应区域,并采用重叠PCR技术构建杂合酶基因AEXynM.分别将AEXynM和AusXyn11A在毕赤酵母GS
【机 构】
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扬州大学 动物科学与技术学院,江苏 扬州 225009 江南大学 医药学院,江苏 无锡 21412
【出 处】
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中国畜牧兽医学会养牛学分会第八届全国会员代表大会暨2015年学术研讨会
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为了充分发挥宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001所产的木聚糖酶(AusXyn11A)比酶活高的优势,同时提高其热稳定性,使其适应饲料工业中的高温环境,本研究通过理性设计的方法确定用一种细菌来源的极端耐热木聚糖酶基因Evxyn11TS的N端序列替换AusXyn11A中的对应区域,并采用重叠PCR技术构建杂合酶基因AEXynM.分别将AEXynM和AusXyn11A在毕赤酵母GS115中进行表达,然后考察温度对重组木聚糖酶reAEXynM和reAusXyn11A活性及稳定性的影响.结果表明,reAEXynM的比酶活为19,237U/mg,稍低于reAusXyn11A.reAEXynM的最适反应温度为70℃,75℃以下稳定,比reAusXyn11A分别提高了20℃和30℃,表明杂合酶的热稳定性得到了明显提高.
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